| 研究課題/領域番号 |
10671079
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
荒木 栄一 熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (10253733)
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| 研究分担者 |
豊永 哲至 熊本大学, 医学部, 助手 (60295128)
岸川 秀樹 熊本大学, 医学部, 講師 (30161441)
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| キーワード | インスリン / インスリン受容体 / IRS-1 / 肥満 / ノックアウトマウス |
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| 研究概要 |
1. 正常IRS-1、変異IRS-1発現細胞におけるホルモン、サイトカインの影響の解析。
正常IRS-1.PrO^<170>→Arg、Met^<209>→Thr、Gly^<971>→Arg、Ser^<809>→Pheの変異を持つ変異IRS-1蛋白をコードする発現ベクターを構築、正常および変異IRS-1を発現する細胞を単離した。さらに、正常IRS-1発現細胞に、ブラジキニン受容体、インスリン受容体を導入した。
正常IRS-1発現細胞を高血糖、またはTNFαで処理すると、インスリンによるインスリン受容体およびIRS-1のチロシンリン酸化が低下した。一方、正常IRS-1にブラジキニン受容体を発現させた細胞では、ブラジキニン前処理によってインスリン刺激によるインスリン受容体およびIRS-1のチロシンリン酸化が増強した。
以上のごとく、細胞レベルでインスリン作用を減弱、あるいは増強しうる状態を確認しえた。
2. IRS-1欠損マウスにおける肥満の影響の解析。
IRS-1欠損マウスに存在するインスリン抵抗性が、肥満によりいかに影響を受けるかを解析するため、コントロール、およびIRS-1欠損マウスのへテロにGTG(gold thioglucose)を注射し、肥満を導入、血糖値、インスリン値などを測定した。
その結果、空腹時血糖値は肥満コントロール、および肥満IRS-1欠損マウスのへテロで差を認めなっがったが空腹時のインスリン値は肥満IRS-1欠損マウスのへテロで有意に高値であり、インスリン抵抗性の存在が示された
3. 変異IRS-1、IRS-2発現トランスジェニックマウスの作製。
ドミナントネガティブに作用すると考えられる変異IRS-1、IRS-2のcDNAを構築した。更に、これらのcDNAをインスリン遺伝子プロモーター、サイトメガロウイルスのプロモーター支配下に発現する発現ベクターの構築に成功した。
現在、培養細胞にこれらの発現ベクターを導入し、その機能解析を行っている。
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