| 研究課題/領域番号 |
10671148
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
椎葉 健一 東北大学, 医学部附属病院, 講師 (90196345)
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| 研究分担者 |
七條 茂樹 久留米大学, 医学部, 助教授 (30080592)
関 直子 久留米大学, 医学部, 助手 (40226634)
松野 正紀 東北大学, 医学部, 教授 (80004737)
溝井 賢幸 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (90271949)
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| キーワード | 胃癌 / 癌拒絶抗原 / 癌ワクチン / HLA / CTL / SART-1 |
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| 研究概要 |
1) SART-1蛋白由来HLA-A2結合性抗原ペプチドの決定:既に肺腺癌浸潤リンパ球(TIL)より樹立したHLA-A2拘束性CTL株が、HLA-A2拘束性にSART-1癌拒絶抗原を認識することを確認しているが、推定されるSART-1蛋白内のHLA-A2結合性ペプチドを合成した。この中から、特異的CTL株に対するIFN-γ産生誘導能を指標に、CTL株に認識されるペプチドを数個同定した。現在、これらの候補ペプチドを高純度合成し、健康人及び癌患者末梢リンパ球からのHLA-A2拘束性CTL誘導能を、IFN-γ遊離法ならびに^<51>Cr-遊離法を用いて検討中である。予備実験においては、候補ペプチドの一つにより、健康人末梢血リンパ球からHLA-A2拘束性CTLが誘導されるのを確認している
2) HLA-A0201拘束性CTL株の大量培養とその保存:研究分担者らにより既に樹立、凍結保存されていた胃癌浸潤リンパ球由来HLA-0201拘束性癌特異的CTL株を凍結融解し、照射済みHLA-A2陽性PBMCをフィーダー細胞に用いて、IL-2存在下に培養し、大量増殖させ、凍結保存した。
3) Gene-exression cloning法によるHLA-A0201拘束性胃癌拒絶抗原遺伝子のクローニング:HLA-A0201cDNA及び胃癌細胞株(mkn-45)cDNAライブラリーをCOS7細胞へco-transfect後、2)にて樹立したHLA-A0201拘束性CTL株とco-cultureし、IFN-γ産生誘導能を指標に、1次及び2次スクリーニングを行い、数個の候補DNAが得られた。これら候補DNAは、その産物が特異的CTL株により、HLA-A0201拘束性に認識されることも確認しており、サブクローニングも終了し、現在塩基配列決定のためのシークエンスを行っている。
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