| 研究概要 |
DNAの細胞内導入キャリアーとしてカチオン性liposomeや塩基性polypeptideは、ウイルス性のキャリアーに比べて導入効率は低いが安全性の点で有望視されている。塩基性polypeptide(lysine,ornithine,arginine)の導入効率をさらに向上させるために、3級アミンをもつコレステロール誘導体(3-b-[N-(N',N'-dimethyl-aminopropane)-carbamoyl]-cholesterol)を主成分とするliposomeの影響を検討した。更に、線形の構造を持つpoly-L-lysine系ペプチドの他に、枝分かれした構造を持つdendritic-peptideを合成し、これを用いて一定濃度のリポソーム存在下での遺伝子導入効率の研究を行った。評価系としてHeLaS3細胞へのpSV2CAT及びpGL3の導入に伴うCAT及びルシフェラーゼ活性発現を指標とした。
8本の枝分かれ側鎖をもつリジン残基から構成されるdendritic-peptideを併用することにより遺伝子発現量は、リポソーム単独時に比べ2-3倍増加した。側鎖の長さが発現量に影響し、リジン残基数12個の側鎖のものより3個からなるpeptideにおいて発現量は増加した。一方、4本の枝分かれ側鎖を持つペプチドでは、残基数3個に比べ9個の方が発現量は増加した。枝分かれペプチドの至適濃度は、poly-L-lysineに比べ低濃度側にシフトしたが、遺伝子発現量には際立った違いは認められなかった。
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