| 研究課題/領域番号 |
10672029
|
|---|
| 研究機関 | 星薬科大学 |
|---|
研究代表者 |
吉村 吉博 星薬科大学, 薬学部, 講師 (00147894)
|
|---|
| 研究分担者 |
渡辺 卓穂 星薬科大学, 薬学部, 助手
中澤 裕之 星薬科大学, 薬学部, 教授
|
|---|
| キーワード | 一酸化窒素 / 分離分析 / フリーラジカル / 生体試料 |
|---|
| 研究概要 |
これまでNOのみを選択的に消去できるNO消去剤Carboxy-PTIOをスピントラッピング剤として用い、HPLC/ECD/ESRシステムによる分析法を検討してきた。しかし、Carboxy-PTIOは還元性物質と反応し、Carboxy-PTIOを消費するため、生体内のNO定量に誤差を生じた。そこで、Carboxy-PTIOの代替としてTMA-PTIOを用い、リポソームを包埋させ、生体内の還元性物質による安定性及び定量性を検討した。さらに生体試料中のNOの分析に応用した。
TMA-PTIOの標準品およびリポソームPTIOをHPLCシステムにより測定した結果、それぞれ4.3分にピークを検出した。TMA-PTIO及びリポソームPTIOにNOCより発生したNOを反応させ、その定量性範囲を測定した結果、10nM〜100μMの間で直線性が認められた。そのTMA-PTIOの検出限界は5nM(S/N=3)であった。リポソーム-PTIOの還元剤による安定性をCarboxyl-PTIOと比較した結果、リポソームPTIOは尿酸、グルタチオンなどで影響を受けなかった。生体への応用として、雄性モルモットにOvalbumineを点眼して感作後、涙液中のNO生成量を測定した結果、1.7μMのNO生成が認められた。
|
