| 研究概要 |
本研究は、肝臓に特異発現するCa^<2+>シグナリングの制御蛋白質レギュカルチン(regucalcin;RC)の遺伝子の発現調節機構を究明することを目的にしている。特に,RC遺伝子プロモーター領域のNF-1結合配列を認識する肝細胞核因子の結合がプロテインキナーゼによるリン酸化によって変化するのかについて,クローン化ラット肝がん細胞(Hg-II-E)を用いて調べた。その結果,RC遺伝子プロモーター領域のNF-1結合配列(TTGGC)に特異結合する核蛋白質は、プロテインキナーゼC,チロシンキナーゼ及びCa^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼによってリン酸化を受けることが,それらキナーゼの特異的阻害剤を用いて明らかにした。そこでさらに,RC遺伝子のプロモーター領域に特異結合する転写因子の同定を行なうために、ワンハイブリッド法によってクローニングを行なった。その結果、RC遺伝子プロモーター領域のTTGGC配列に結合する核内蛋白質として、NF-1(IIa)と他の転写因子が関与することが見出された。他の転写因子のcDNAクローニングの結果、新規蛋白質であることが判明した。これまでの知見から、RC遺伝子の発現は、Ca^<2+>シグナリングによって調節されており、核内の転写因子をリン酸化することにより、RC遺伝子のプロモーター領域の、TTGGC配列に結合することにより増進されることが解明された。
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