| 研究概要 |
(1) Pγリン酸化酵素について
(1) 酵素精製;Pγをリン酸化する酵素は,部分精製の結果44kDaの分子量を持つMAPKinaseに非常によく似た酵素であることが明らかとなった。この酵素を次のような過程で精製を行った。
ウシ桿体視細胞→Caを含む緩衝液で抽出→MonoQ→ゲルろ過(TSK-250)→Heparin-Sepharose→ATP-Agarose→Pγアフィニティ力ラム
(2) アミノ酸配列決定;精製した酵素を用いてアミノ酸配列を決定中である。
(3) 酵素の性質;Pγリン酸化酵素を精製し,現在,今まで報告されているMAPKinaseと比較している。特にリン酸化の機構についてMAPKinaseと比較,検討を行う。
(2) Pγのリン酸化に影響を及ぼす因子について
PγKinase活性の制御にCa結合蛋白質が関与していると考えそのCa結合蛋白質を,精製した結果,分子量が26kDaであった。現在,この26kDaのCa結合蛋白質のアミノ酸配列を決定しPγKinaseのアミノ酸配列と比較している。今後,このCa結合蛋白質によるPγKinaseの制御機構を明らかにしたい。
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