|
ラット下垂体腫瘍のエストロゲン依存性増殖に関わる遺伝子発現について明らかにする目的で、平成10年度にエストロゲン応答性増殖をする下垂体細胞株MtT/E-2を樹立し解析した。本年度は、A)原発性下垂体腫瘍を材料にPTTG遺伝子の発現解析および、B)樹立細胞株MtT/E-2と正常下垂体の間のdifferential displayによる解析を行った。
成果:A.下垂体腫瘍に高発現するがん遺伝子として見いだされたPTTGmRNAの発現を、エストロゲンによって誘発された原発性下垂体腫瘍において解析し腫瘍化への関与を検討した。1)ラット下垂体においてPTTGの発現がエストロゲンにより調節されていることが明らかになった。2)ラット下垂体のエストロゲンに対する応答性はラットの系統により異なるが、PTTG発現様式にも系統差がみられ、それらが相関していた。3)PTTGのエストロゲン応答性発現機構を解析するため、PTTG遺伝子プロモーターをクローニングし発現レポーター実験を行った結果、エストロゲンによる弱い調節が観察された。これらの結果より、PTTGはエストロゲンにより発現調節され、その発現が下垂体腫瘍化に関与していることが示唆された。
B.エストロゲン処理した樹立細胞株MtT/E-2、原発性下垂体腫瘍組織および正常下垂体組織それぞれのtotal RNAのdifferential displayによる比較解析をおこない、12個のエストロゲン応答性でかつ腫瘍特異的と考えられるmRNAフラグメントを検出した。
|
