| 研究概要 |
近年の遺伝子工学の進歩により、これまで不明な点の多かった脳の形成機序も次第に明らかにされつつある。しかし、哺乳類の脳の発生に関しては、胎仔への外科的アプローチが容易でないため、授精卵レベルの遺伝子操作や組織培養に頼らざるを得ない現状である。この問題を解決するために、我々は今回、子宮外手術法をもちいてマウス胎仔の脳内に遺伝子を直接的に導入することを考えた。そのような実験系を適応するため、まず、脳の形成過程の分子メカニズムを、各種活性分子の免疫組織化学や蛍光標識法などの形態学的手法を用いて調べ、正常マウス中脳におけるドーパミンニューロンの移動に神経接着分子L1と脳特異的コンドロイチン硫酸プロテオグリカンであるファスファカンの相互作用が関係すること(Ohyama,Kawano,Kawmuraら、Dev.Brain Re.1998)また転写調節因子Pax-6を欠損する突然変異ラットを用いて、Pax-6が大脳新皮質の神経回路形成に重要な役割を果たすことを明らかにしてきた(Kawano,Takeuchi,Kawamuraら,J.Comp.Neurol.1999印刷中;川野ら、神経科学大会、1999年9月発表済み)。これらの観察結果をもとにして、本研究では、Muneokaら(1986)によって開発された子宮外胎仔手術法をもちいて胎生12〜14日のマウスの脳室内に各種薬物、酵素、抗体などを微量注入し、数日間母体内で生存させることに成功した。本研究の成果は、今後、特定のDNAを組み込んだウイスルベクターを導入することにより、遺伝子の発現増強あるいは発現抑制を可能にするものであり、脳の発生過程における各種遺伝子の機能を特定する方法として、その有効性が注目される。
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