Helicobacter pylori感染によるマウス胃癌モデルの作製

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10680779
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 喜多 正和 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60153087)
• キーワード: Helicobacter / 感染 / 癌 / ENNG / マウス

研究概要

1、H.pylori持続感染マウスモデルおよびマウス胃癌発症モデルの検討
H.pylori標準株であるATCC43504株、臨床分離株であるCPY2052,CPY3401,HPK127株を、C57BL/6マウスに胃ゾンデを用いて胃内投与し、H.pyloriの胃内定着をPCR法および培養法で経時的に検討するとともに胃炎および胃癌発症の程度を病理組織学的に検討した結果、CPY2052株のみが胃炎および胃潰瘍を惹起することが明らかとなったが、H.pylori単独感染では胃癌の発生は認められなかった。
そこで、H.pylori持続感染マウスに発癌剤N-ethyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(ENNG)を投与することにより、発癌率に及ぼすH.pylori感染の影響を検討した。実験群として1)対照、2)発癌剤のみ(ENNG 100ppm)、3)H.pylori感染のみ、4)H.pylori感染+発癌剤の4群を作製し、発癌剤およびH.pylori投与50週後に胃および十二指腸を採取し、胃癌発症を病理組織学的に検討した。その結果、H.pylori感染+発癌剤群ではH.pylori感染群に比べadenomatous hyperplasiaの発生頻度が高かった。また、H.pyloriの代わりにH.felisを用いた結果、H.felis感染+発癌剤群で有意にadenomatous hyperplasiaの発生頻度が高かった。
2、病原性の異なる臨床分離株の樹立
京都府立医科大学病院および関連病院に来院した患者からH.pylori臨床分離株100株以上を樹立した。その中から71株を選択し、サイトカイン(IL-6,IFN-γ,TNF-α)産生能をin vitroで検討した結果、サイトカイン産生能の高い株と低い株が存在することが明らかとなった。現在、サイトカイン誘発能の高い株を選択し、マウス胃内定着率および胃炎発症率を検討中である。

研究成果

• [文献書誌] Sawai N,Kita M et al.: "Role of gamma interferon in Helicobacter pylori-induced gastric inflammatory responses in a mouse model"Infec.Immun.. 67(1). 279-285 (1999)
• [文献書誌] Yamaoka Y,Kita M et al.: "Relation between clinical presentation,Helicobacter pylori density,interleukin 1beta and 8 production,and cagA status"Gut. 45. 804-811 (1999)
• [文献書誌] Tanahashi T,Kita M et al.: "Comparison of PCR-restriction fragment polymorphism analysis and PCR-direct sequencing methods for differentiating Helicobacter pylori ureB gene variants"J.Clin.Microbiol.. 38. 165-169 (2000)
• [文献書誌] Tanahashi T,Kita M et al.: "Cytokine expression and production by purified Helicobacter pylori urease in human gastric epithelial cells"Infec.Immun.. 68. 664-671 (2000)
• [文献書誌] Imanishi J,Kita M et al.: "Role of cytokines in the pathogensis of gastrointestinal diseases associated with Helicobacter pylori infection"C.R.Soc.Biol.. 192. 991-996 (1998)