| 研究概要 |
細胞接着活性を有するオリゴペプチドRGDS、RYDS、EILDV、YIGSR、IKVAV等を液相法により合成し、元素分析、アミノ酸分析、TOF-MS、NMR等により合成されていることを確認した。また、RGDSミメティックペプチドとしてHar-Gly-Asp-Ser(hRGDS),Can-Gly-Asp-Ser(CaGDS),Arg-Nip-Asp-Ser(RNiDS),Arg-Pro-Asp-Ser(RPDS)等を昨年度に引き続き合成し最適な合成方法を確立した。また、昨年度の研究結果から、アルギニンを置換しても活性が維持されることをより明確にするため、グアニジド基を変換したNio-Gly-Asp-Ser(OiGDS)とOrn-Gly-Asp-Ser(OrGDS)を新たに合成することに成功した。これら、RGDSミメティックペプチドは、元素分析、TOF-MS、NMRにより合成を確認した。さらには、フィブロネクチンの細胞接着活性部位近傍の配列VTGRGDSPASSの鎖長を検討するためRGDSから種々鎖長を伸長したペプチドを合成した。これに加えてRGDSのN,C両末端にβ-ターン構造を構築するような配列を分子設計し合成した。
これらのRGDSミメティックペプチドを用いて,血小板凝集阻害実験を行い、IC50を求めることによりミメティックペプチドの構造活性相関について検討を加えた。その結果、アルギニン部分は、アミノ酸を置換し側鎖長などを変化させてもグアニジド基があれば活性発現が見られるが、アスパラギン酸残基は置換することは出来ず側鎖のカルボキシル基の存在の重要性が示唆された。また、グリシン残基部分は、主鎖構造において構造制御可能なアミノ酸であれば、他のアミノ酸に置換しても活性は発揮することか判明した。RGDSのN,C両末端に鎖長を10残基程度まで伸長すれば、鎖長に依存して明らかに活性が増強されることが明らかになった。β-ターン構造を構築するように分子設計したペプチドは、設計通りβ-ターン構造を構築することが、CD測定より明らかになった。
以上のことが平成11年度の研究で明らかになった主なものである。
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