粘膜免疫応答を誘導するDNAワクチンの開発

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10760175
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 高田 礼人 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助手 (10292062)
• キーワード: 粘膜免疫 / DNAワクチン / IgA抗体 / オーエスキー病ウイルス / インフルエンザウイルス

研究概要

オーエスキー病ウイルスの表面糖蛋白gBを発現するプラスミドを構築した。これに市販のリポソームとコレラトキシンBサブユニットをアジュバントとして加えたワクチンをマウスに接種し、抗体応答および感染防御効果を調べた。鼻腔内にワクチンを接種したマウスの呼吸器分泌液中にgB特異IgA抗体が血清中にIgG抗体が検出された。これらのマウスの40%が致死量のウイルス攻撃に対して生残した。また、死亡したマウスでも生残時間の延長が認められた。一方、筋肉内にワクチンを接種したマウスでは、血清中にIgG抗体が検出されたが、呼吸器分泌液中には抗体が検出されなかった。これらのマウス全てがウイルス攻撃後、コントロールのマウス同様の経過で死亡した。gB遺伝子を組み込んだリコンビナントバキュロウイルスをマウスの鼻腔内に接種すると同様の抗体応答を誘導することが判明した。これらの成績はgBを動物の粘膜細胞に発現させるワクチンがオーエスキー病の予防に有効である事を示唆している。
インフルエンザウイルス(A/Aichi/2/68)のヘマグルチニンを発現するプラスミドを構築した。これを用いてDNAワクチンの粘膜投与における抗CD40抗体または多重膜リボソームのアジュバント効果を検討した。CD40分子は抗原提示細胞の表面糖蛋白であり、これを刺激する事によって免疫応答を増強する事が期待された。抗CD40抗体を混合したワクチンを鼻腔内に接種したマウスの呼吸器分泌液中に特異IgG抗体が検出された。リポソーム単独をアジュバントとして用いた場合には抗体応答は認められなかった。

研究成果

• [文献書誌] Takada, A., et al.: "An Avirulent avian influenza virus as vaccine strain against a potential human pandemic"Journal of Virology. 73. 8303-8307 (1999)
• [文献書誌] Takada, A., et al.: "Protective effects of intranasal vaccination with plasmid encoding pseudorabies virus glycoprotein B in mice"Japanese Journal of Veterinary Research. 47. 15-33 (1999)
• [文献書誌] Imai, M., et al.: "Antigenic and genetic analyses of H5 influenza viruses isolated from wild ducks in Asia"Japanese Journal of Veterinary Research. 46. 171-177 (1999)
• [文献書誌] Aoki, H., et al.: "Induction of antibodies in mice by a recombinant baculovirus expressing pseudorabies virus glycoprotein B in mammalian cells"Veterinary Microbiology. 68. 197-207 (1999)