|
ラット腎髄質尿細管細胞における尿素輸送体(rUT-A1)の発現を、遺伝子(mRNA)レベルで調べた。成人Wistarラットの腎髄質内層集合管の初代培養細胞を用いて、初めに高浸透圧負荷後のmRNA発現の経時的変化をNorthern blot法により調べた。200mOsmol NaClおよびマニトール負荷により、rUT-A1 mRNA発現量は24時間後に5倍増加し、36時間後では2-3倍の増加であった。200mOsmol尿素の負荷では発現は増加しなかった。次にバソプレッシン(AVP)負荷後のmRNA発現の変化をNorthern blot法により同様に調べた。AVP(10nM)および8-bromo-cAMP(1mM)の投与は、rUT-A1 mRNA発現量を24時間をピークとして増加させた。以上の結果より、腎髄質内層集合管細胞においては、rUT-A1 mRNA発現量は、高張液負荷およびV2受容体を介するAVP刺激により誘導されることが明らかになった。さらにrUT-A1の遺伝子発現に関わる転写段階での調節を調べるために、高浸透圧負荷及びAVP負荷後の転写活性の経時的変化をみる核Run-onアッセイを次年度(平成11年度)に行う予定である。
|
