高ホモシステイン血症による動脈硬化発症機序の解明のための基礎的研究

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10770288
• 研究機関: 鳥取大学
• 研究代表者: 古和 久典 鳥取大学, 医学部・附属病院, 助手 (30284003)
• キーワード: 高ホモシステイン血症 / 動脈硬化 / 血管内皮培養細胞 / 血管平滑筋培養細胞

研究概要

軽度の高ホモシステイン(Hcy)血症が決して稀な病態でないことがわかってきた現在,Hcyと動脈硬化との関連性の解明は重要な課題と考える.昨年度われわれは、ヒト血管内皮培養細胞(HUVEC,生化学工業,5次培養)およびヒト血管平滑筋培養細胞(HASMC,クラボウ,5次培養)を用いてHcy添加による細胞生存率の変化を検討した.Hcy添加48時間後までの経時的変化をみた結果,HUVEC,HASMCともに1mM添加では、対照(0mM)と同様か軽度増加傾向を示すものの、5mM,10mM添加では濃度に依存して生存細胞率は低下した.低濃度のHcy添加により細胞増殖傾向が認められることは,高Hcy血症に基づく動脈硬化を示唆する結果と考えた.今年度われわれは,Hcyに基づく血管細胞障害因子を詳細に検討するため,安定した培養状態のHUVEC,HASMCに対して,1mMのHcyを4時間添加後,ISOGEN(ニッポンジーン)を用いて総mRNAを回収した後,RT-PCR法により,cDNAを合成した.Hcy無添加の他は同様の条件にて得られたcDNAを対照として,DNAアレイ・フィルター(GDA 1.3,GenomeSystems)を用いて,発現遺伝子の単離を行った.現在,Hcy添加の有無による誘導発現の差異を解析中である.差違を明らかにすることによって高Hcy血症に基づく血管細胞障害因子を明らかにしていく予定である.

研究成果

• [文献書誌] Kowa H,et al.: "MTHFR polymorphism in patients with Parkinson's disease in Japanese population"Parkinsonism & Related Disorders. 5(supple). S4 (1999)
• [文献書誌] Yasui K,Kowa,et al.: "Elevated plasma levels of homocysteine in Parkinson's disease"Parkinsonism & Related Disorders. 5(supple). S27 (1999)
• [文献書誌] Kowa H,et al.: "MTHFR polymorphism in patients with headache"Cephalagia. 19・4. 423 (1999)
• [文献書誌] Urakami K,Kowa H,et al.: "Screening for mutation of the tau gene in patients with tauopathy"Alzheimer's Repoprts. 2・4. 213-215 (1999)
• [文献書誌] JiY,Kowa H,et al.: "Acetylator genotype in patients with Parkinson's and sporadic Alzheimer's disease"Alzheimer's Reports. 1・6. 361-363 (1998)