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高血圧発症後(6週)の高血圧自然発症ラット(SHR)およびその正常対照群であるWKYラットより、脳、心臓、肝臓、腎臓、肺、骨格筋を摘出し各組織よりtotalRNAを抽出した。Total RNAはDnase処理を行い十分純度が高かったのでこれをテンプレートにreversetranscriptaseによりcDNAを作成した。Chatterjeeら(J.Biol.Chem.1997;272:15481)の方法に準じてPCRのprimerはfull sequence増幅用にヌクレオチド1-24、1564-1590に相応して作成した。truncated formのRGS3検出用にヌクレオチド937-965に対するprimerを作成し先のprimer(1564-1590)と組み合わせて3'側の増幅を行った。truncated formのRGS3は5'側が欠損しているため、full sequence用のprimerでは増幅されずより3'側に設定されたtruncated form用のpriimerによってのみ増幅される。それぞれの組織でRGS3の発現をfull sequence、truncated formで検討したところSHR、WKYの各組織ではtruncated formのRGS3が発現されていることが確認された。一方、full sequenceRGS3の発現はまだ確認されていない。SHR、WKY間でRGS3の発現をGAPDHに対する比で検討したが、大きな差はみられていない。現在同様の検討をRGS4について行っている。
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