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家族性アルツハイマー病の病因遺伝子として、プレセニリン(PS)の発見は大きな意義があったが、その生理的意義は未だ明らかでない。われわれは以前に、マウス脳ライブラリからYeast two hybrid法によりPS結合蛋白であるプレセフィリン(PSP)をクローニングした。これまでにPSPは6084塩基、2027アミノ酸からなる非膜結合性蛋白であること、脳特異的発現を示し、細胞質に発現していること、Src Homology3(SH3)およびSH3結合ドメインを持つこと、免疫共沈降法によりPSのみならず、チロシンキナーゼ情報伝達系のアダプター蛋白であるCrk蛋白とも結合することなどを示し、PSおよびPSPのチロシンキナーゼ情報伝達系との関連を検討してきた。今年度は、ヒト脳ライブラリを用いてのプラーク・ハイブリダイゼーション法およびクロンテックMarathon-Readyヒト脳cDNAを用いた5'-RACE法を併用して、PSPのヒト・カウンターパートのクローニングを行った。得られたクローンはcoding regionが6093塩基で2030アミノ酸からなり、マウスのものと同様に5'末端に1つのSH3ドメイン、3'末端に2つのSH3結合ドメインを持つことが明らかとなった。マウスとのホモロジーはDNAで91.4%、アミノ酸で97.9%であった。また、現在このヒトPSPの一部をGST結合蛋白として作製し、これを用いてウサギ・抗ヒトPSPポリクローナル抗体を作成中である。
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