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1.副腎特異的エンハンサー領域の決定
pGV-lucにβアクチンプロモーターを組み込んだヘクター(βApGV-luc)に5上流ゲノムDNAを3側より順次欠質させた変異DNAや中間配列を欠質させたDNA断片を結合させ、Y-1細胞に遺伝子導入しルシフェラーゼ活性を測定することによりエンハンサー領域を決定した。副腎やY-1細胞より精製した核抽出物を用いて、エンハンサー活性を持つ領域に対してDNaselフットプリント法やゲルシフト解析、位置指定変異導入法により確定した。
2.副腎特異的転写因子のクローニング
決定した塩基配列をプローブとして副腎mRNAより作製した発現cDNAライブラリーをスクリーニングすることにより副腎特異的転写因子をクローニングした。
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