| 研究概要 |
下垂体腺腫(非浸潤性・浸潤性)、下垂体癌及び正常下垂体を用いて、RNAを抽出。チロシンキナーゼ型遺伝子のキナーゼドメインにおけるコンセンサス配列に対するdegenerated primerを利用して、RT-PCRを施行。RT-PCRの産物をベクターに組み込み、トランスフォーメーションした後に、各々について約100クローンをクローニングした。約200塩基の部分配列をシークエンスし、塩基配列を決定。ホモロジー検索にて発現を認めるチロシンキナーゼを同定した。
新たなチロシンキナーゼ型遺伝子は発現されなかったものの、下垂体腺腫での発現が報告されていない遺伝子が同定された。正常下垂体と下垂体腺腫に共通して発現を認めたものとしてはIGF1R,Tie-1,JAK1,FAKなどがあり、一方HEK family,EGFR,FGFR,pdgfR(a,b),c-metなどは下垂体腺腫においてのみ発現を認めた。
下垂体腺腫の手術摘出標本や病理解剖での組織標本を用いて、免疫組織学的手技を利用し、組織内発現を評価した。上記のチロシンキナーゼ型受容体のうち、c-metは下垂体癌においてのみ高度陽性を認め、悪性化への関与が示唆された。
現在、下垂体腺腫にのみ認められた他のチロシンキナーゼ型受容体についての免疫組織学的検討を行っている。またc-met遺伝子の突然変異・再配列の検討に加え、リガンドであるHGFの負荷試験を下垂体腺腫細胞株を用いたin vitro assayを施行中である。
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