| 研究概要 |
今まで注目を浴びなかった海岸地下水脈という暗黒世界に生育する原生生物の多様性の実体を明らかにし,さらに分子系統学的手法を用いてそれらの起源について探ることを目的とした。フィールドは北海道石狩市石狩浜で,月に1回の割合で定期的に調査をおこなった。また,研究対象は最も出現種の多かった渦鞭毛藻類とした。本研究の結果,次の点が明らかとなった。海岸地下水脈は塩分濃度が潮汐と地下水の影響を受けダイナミックに変化するが渦鞭毛藻類は比較的塩分濃度の高い地点で出現種数が多かった。ただし,広範囲の塩分濃度で生育が可能な種もいくつか認められた。種組成の季節変化も見られたが一般的には水温の高い夏には種数が減少した。一方,水温が零下になる冬期間にも多様な渦鞭毛藻類の出現が確認された。調査期間を通して出現した渦鞭毛藻類はAmphidinium11種,gymnodinium2種,Gyrodinium3種,Katodinium4種,Sinophysis1種,Roscoffia1種などであった。これらはいずれも葉緑体をもたない従属栄養性の種である。
これらの渦鞭毛藻類の起源と種間の類縁関係を探るために,分子系統学的解析を企画した。培養方法が確立していないため,単細胞PCR法によることとし,まずそのための諸条件を検討した。アニーリング温度や時間等の検討の結果Gyrodinium viridescensで18SrDNAのほぼ全長の塩基配列の解析に成功した。既知の配列と本研究で解析した光合成種の配列を加え,系統解析をおこなった。その結果,従属栄養性のG.Viridescensは光合成性で砂地性のAmphidinium属のメンバーから派生していることが明らかとなった。このことは本種では葉緑体を二次的に失ったこと,Gyrodiniumに特有な形態はAmphidinium型の細胞から進化した可能性のあることを示している。
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