| 研究概要 |
本研究では2系統のヌードラットを用いることによってgraft versus host reaction(GVHD反応)を含む免疫拒絶色反応を起こさない外科的キメララットを作成する系が可能である.また,本研究では組織適合性抗原が異なるため,モノクローナル抗体を用いることによって,donor由来かrecipient由来かを形態的に区別できる.本研究ではこれらの外科的研究に対応するモデルをまず作成している.形態学的観察には共焦点レーザー蛍光顕微鏡を用いることによって,立体的な微細構造の把握が可能である.
動物実験として2系統のヌードラットを使用する.ラットはPVGrnu/rnu(RTl^*c,雄PVGrnu/rnu.雌PVG十/rnuの交配による.)とWAGrnu/rnu(RTl^*u.雄WAGrnu/rnu,雌WAG+/rnuの交配による.)を用いている.これら2系統のヌードラットはいずれも国内にはいないため,輸入し繁殖中である.抗体は一次抗体としてMRC OX27(mouse anti-RTlA^*c IgG2a antibody)とNR3/31(rat anti-RTlA*uIgG2b antibody,Serotec,Bicester,GB)をbiotinylationして用い,二次抗体としてsheep anti-mouse lgG FITC antibodyとsheep anti-blotin strepto-avidin-Rodaminを使用している.組織の観察には凍結切片から免疫二重染色を行っているが,最も良い条件を探しているところである.
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