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2010 年度 実績報告書

鋳型高分子を用いたタンパク質アレイの創製と高次構造の制御

研究課題

研究課題/領域番号 10J01975
研究機関大阪大学

研究代表者

小野 利和  大阪大学, 大学院・工学研究科, 特別研究員(SPD)

キーワードタンパク質ナノ集合構造 / ヘムタンパク質 / 合成高分子
研究概要

これまでに受入研究者のグループでは、ヘムタンパク質におけるヘムとタンパク質の安定な非共有結合・配位結合相互作用を利用して、超分子ヘムタンパク質ポリマーの構築を実施している。しかしながら、得られる超分子ポリマーは、分子量の制御が難しく、形状サイズ分布が極めて広い。この問題を克服するために、本研究では、タンパク質の順序や数を規定してタンパク質を配列するための手法として、ヘムを側鎖に有する合成高分子を利用した新しいヘムタンパク質高次自己組織化集合体を構築し、バイオデバイス、医療材料、触媒等の有用なナノマテリアルへの応用に向けて研究を実施した。
本年度は具体的には以下の項目を実施した。
(1)鋳型となるヘム修飾合成高分子の調製とヘム修飾高分子を用いたタンパク質アレイの創製
分子量の異なるポリアリルアミン、ポリアクリル酸を出発原料として、側鎖にヘム(鉄ポルフィリン)を部分修飾(0.5-5%)した鋳型となる高分子を調製した。それぞれの鋳型高分子に、ヘムを除いたアポタンパク質を加え、高分子側鎖のヘム基とタンパク質のヘムポケットの相互作用による再構成を行い、合成高分子とヘムタンパク質の複合化を行った。吸収スペクトル、サイズ排除クロマトグラフィーの結果から、ポリアクリル酸の修飾型高分子と酸素貯蔵タンパク質であるミオグロビンを用いた場合、効率良く複合化可能であることが分かった。
(2)鋳型となるヘム修飾合成高分子の調製とヘム修飾高分子を用いたタンパク質アレイの直接観察
調製した鎖長のことなるポリアクリル酸とヘムタンパク質の各種複合体を、マイカあるいは高配向性結晶グラファイトにのせて、原子間力顕微鏡で複合体の集合状態の観察をおこなったところ、合成高分子とヘムタンパク質が二次元ネットワーク上につながったナノ構造を観察することに成功した。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2011 2010

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] Thiourea-tagged poly(octadecyl acrylate) gels as fluoride and acetate responsive polymer gels through selective complexation2011

    • 著者名/発表者名
      Janakiraman Krishnamurthi, Toshikazu Ono, Shogo Amemori, Hiromu Komatsu, Seiji Shinkai, Kazuki Sada
    • 雑誌名

      Chem.Commun.

      巻: 47 ページ: 1571-1573

    • 査読あり
  • [学会発表] 非極性溶媒中で機能する高分子電解質を用いた複合膜の調製2011

    • 著者名/発表者名
      太田匡彦, 小野利和, 小門憲太, 佐田和己
    • 学会等名
      日本化学会第91春季年会
    • 発表場所
      神奈川大学、横浜
    • 年月日
      20110326-20110329
  • [学会発表] 非極性環境下で機能する親油性高分子電解質のコンホメーション変化2010

    • 著者名/発表者名
      伊勢田一也, 小野利和, 佐田和己
    • 学会等名
      第59回高分子討論会
    • 発表場所
      北海道大学、札幌
    • 年月日
      2010-09-15
  • [学会発表] 水素結合部位を有する親油性高分子電解質の有機溶媒中における温度応答挙動2010

    • 著者名/発表者名
      雨森翔悟・小野利和・佐田和己
    • 学会等名
      第59回高分子学会年次大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜、横浜
    • 年月日
      2010-05-26
  • [学会発表] ポリスチレンを主鎖とした親油性高分子電解質の有機溶媒中でのコンホメーション変化2010

    • 著者名/発表者名
      伊勢田一也, 小野利和, 佐田和己
    • 学会等名
      第59回高分子学会年次大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜、横浜
    • 年月日
      2010-05-26

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公開日: 2012-07-19  

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