| 研究概要 |
抗原提示細胞上の補助刺激分子HVEM(ヘルペスウイルス侵入仲介因子)は,抑制型の補助刺激受容体であるCD160(BY55)とBTLA(B細胞・T細胞減弱因子),活性型の補助刺激受容体であるLIGHTにより認識され,抑制あるいは活性シグナルを伝達することが知られている.HVEMはこの他にも,LTαや単純ヘルペスウイルス(HSV)の表面抗原であるgDと相互作用することが知られており,多数の受容体または抗原により認識される非常に珍しい補助刺激分子であり,近年注目を集めつつある.
今年度はHVEMとCD160/BTLA/LIGHTとの相互作用を分子レベルで詳細に解析し,HVEMが持つ多彩な相互作用機能を明らかにすることに取り組んできた.すでに報告されているBTLA結合活性を失ういくつかのHVEM変異体を精製し,CD160, BTLAに対するSPR相互作用解析を行った.その結果,若干の程度の差はあるものの、これらのHVEM変異体がCD160の結合にも影響を与えることを明らかにした.このことからCD160とBTLAのHVEM結合領域は,ある程度オーバーラップしていると考えられる.また,LIGHTを精製し,HVEMとの相互作用解析を行ったところ,LIGHTはCD160やBTLAに比べて強い結合を示した.今後はLIGHTとCD160/BTLAとの競合実験を進めていく予定である.また,CD160単独の結晶化,あるいはHVEMとの複合体結晶化について,これまでに化学修飾(メチル化)を含めて様々な条件下で結晶化を試みたが,現在のところ良好な結晶は得られていない.今後,フレキシブルなN末端・C末端領域を同定し,より結晶化に適したコンストラクトを作製し,結晶化を試みる予定である.
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