| 研究概要 |
最近脳梗塞における炎症においてもT細胞が促進的な役割を果たすことが明らかにされつつある。我々は脳虚血モデルにおいて脳虚血早期にマクロファージが産生するIL-23が、脳虚血遅延期に浸潤するT細胞のIL-17産生を誘導していることを報告した(Nature Med.2009,15,946-950)。しかしIL-10やTGFβなどの抑制性サイトカインや抑制性細胞の寄与は十分解明されていない。TGFβは生体内で恒常的に産生されており、活性化マクロファージに対しては、炎症性サイトカイン及びNOの産生抑制作用を持つ。TGFβ下流の重要なシグナル伝達分子としてSmad2/3が知られており、本年度は、このSmad2/3のマクロファージにおける機能解析を通じて、マクロファージ抑制機構を分子レベルで解明することを目指した。Smad2についてマクロファージ特異的な(LysM-Cre)Smad2cKOマウス、Smad3KOマウス、およびSmad2cKO/Smad3KOマウスを作成し、これらのマウスの腹腔マクロファージ(PEC)とin vitroの骨髄由来マクロファージ(BMDM)にLPSおよびTGFβ刺激を加えて、ELISA, real-time PCR, Western blotting等の解析を行った。これまでにSmad3がNFkB経路を抑制する可能性は指摘されていたが、我々はさらに、Smad2/3がIRF3→IFNβ経路の抑制作用、および、NO生産を抑制するArginaselの発現誘導促進作用を持つことを発見した。Smad2/3の抑制作用が多岐に渡るという発見は、サイトカイン毎にTGFβの抑制作用の影響が異なることと矛盾せず、今後詳細な分子機構の解明を進めていく予定である。また、Smad2/3はiNOS/NO生産を特に強く抑制する。これは、NO生産に至るまでの多段階でSmad2/3が抑制をかけることによるものと考えられる。
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