T4ファージ尾繊維および小尾繊維とリポ多糖との相互作用

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11121212
• 研究機関: 東京工業大学
• 研究代表者: 有坂 文雄 東京工業大学, 生命理工学部, 助教授 (80133768)
• キーワード: バクテリオファージT4 / 尾繊維 / 小尾繊維 / リポ多糖 / Rコア糖鎖 / 糖・蛋白質相互作用 / 感染

研究概要

本年はファージおよび小尾繊維蛋白質の分子認識をさらに詳細に検討するために阪大理学部の米崎哲朗博士によって単離されたnik変異株ファージ(B株にのみ感染でき、K株に感染できない)を用いて解析を行った。表現型は曖昧さがなく、B型にのみ感染し、K12由来株には野生株はもちろんのこと、糖鎖長の異なる一連の変異株にも全く感染できなかった。この特異性がファージの吸着の段階で起こっているかを調べるために、各大腸菌株よりLPSを単離してLPSによるファージの失活を調べたところ、野生株ファージがB株由来のものとD21-e7で失活したのに対し、nikファージはB株由来のLPSでのみ失活した。このことはnik変異が感染初期段階の分子認識に関係していることを示すだけでなく、分子の微妙なコンホメーションを認識していることを示している。今後LPSの構造をさらに詳細に調べて行かなくてはならないが、これと並行してnik変異株ファージの変異部位の決定を行った。まず、おおまかに変異部位の推定を行うためにnikファージと遺伝子9および15に変異を持つamファージとの掛け合わせを行ったところ、両者からほぼ等距離にあるという結果を得た。そこで、遺伝子12に変異を持つ可能性が高いと考え、同変異株の遺伝子12の全塩基配列決定を行った。その結果、残基番号457ロイシンのコドンCTGがTCT即ちセリンに変異していることが分かった。これは遺伝子12のC末端領域にあり、糖鎖認識部位である可能性が高い。

研究成果

• [文献書誌] Masato USHIYAMA: "A 12-Porphysin Construction of a System : Synthesis of Peptide Porphyrin with Multiple Histidines and the Aggregation Behavior in the Presence of Hemin"Bull. Chem. Soc. Japn. 72. 1351-1364 (1999)
• [文献書誌] Kei-ichiro INAMORI: "A Newly Identified Horseshoe Crab Lection with Specificity for Blood Group A Antigen Recognized Specific O-Antigens of Bacterial Lipopolysaccharides"J. Biol. Chem.. 274. 3272-3278 (1999)
• [文献書誌] Shunji KAMAMARU: "C-terminal of the Precursor Tail Lysozyme of Bacteriophage T4 Stays as a Structural Component of the Baseplate after Cleavage"J. Bacteriology. 181. 2739-2744 (1999)
• [文献書誌] Mainul HOQUE: "Nuclear Transport of the major capsid protein is essential for Adeno-Associated Virus Capsid Formation"J. Virol.. 73-9. 7912-7915 (1999)
• [文献書誌] Shigeki TAKEDA: "Comparative Imaging of the T4 Phage Baseplate with Atomic Force and Electron Microscopy"Res. Comm. Biochem. & Mol. Biol.. (in press).
• [文献書誌] Li ZHAO: "Stoichiometry and Inter-subunit Interaction of the Wedge Initiation Complex, Gp10-gp11 of Bacteriophage T4"Biochem. Biophys. Acata. (in press).