1999 年度実績報告書

急性期糖鎖による細胞外マトリックス分子の活性制御と組織修復における役割

研究課題

研究課題/領域番号	11121213
研究機関	お茶の水女子大学
研究代表者	小川温子お茶の水女子大学, 人間文化研究科, 助教授 (90143700)
キーワード	糖鎖 / 細胞外マトリックス分子 / 組織修復 / ビトロネクチン / コラーゲン結合性 / グリコシレーション / 活性制御 / 急性期
研究概要	私達は、創傷や障害によって糖鎖が変化したビトロネクチンが緊急産生され、その顕著なコラーゲン結合性によってマトリックスの構築を促進する治癒機転機構の仮説をたて、これを検証するために以下の研究を実施した。 (1)コラーゲン結合の糖鎖による調節メカニズムの解明 1.コラーゲンとビトロネクチンとの相互作用の解析ヒト血漿ビトロネクチンとI型コラーゲンの結合特性をpH依存性、温度依存性、ならびにコラーゲンの多量体化による影響について解析した。各型のコラーゲンに対する結合を比較したところ、調べたすべてのコラーゲンと結合したが、温度依存性に型による差が認められ、コラーゲンの高次構造の差が結合に影響することが示唆された。 2.相互作用の定量的解析変異体ビトロネクチンや組織修復時のビトロネクチンと、リガンドとの相互作用を微量で定量的に解析するために、表面プラズモン共鳴センサー(BIAcore)を用いて条件検討を行った。ビトロネクチンのセンサーチップヘの非特異的結合が大きいことが問題となったので、コラーゲンを固定化するセンサーチップの種類と固定化方法、ブランクフローセルの調製、pH、温度ならびに流速などの各項目について検討し、ビトロネクチンとI型コラーゲンの相互作用を検出できる条件を見い出した。 3.糖鎖欠損変異体ビトロネクチンの調製と調節に関わる糖鎖結合部位の同定コラーゲン結合の調節に関わる糖鎖の位置と構造を解析するため、ヒトビトロネクチンの3ヵ所の糖鎖結合部位を1箇所、2箇所ずつ、または3ケ所すべて欠失した糖鎖欠失変異体をCHO細胞で発現させたところ、変異体ビトロネクチンが合成され培養上清中に分泌されていることが検出された。定量的解析条件を用いて、さまざまな糖鎖欠失変異体ビトロネクチンのリガンド結合活性を測定し、それらの糖鎖構造との相関を解析する予定である。 (2)肝障害によるビトロネクチンの糖鎖とコラーゲン結合性の変化を調べるために、肝疾患患者および肝障害ラットのビトロネクチンの解析を行った。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] H. Uchibori-Iwaki et al.: "The changes in glycosylation after partial hepatectomy enhance collagen binding of vitronectin in plasma"Glycobiology. (印刷中). (2000)
[文献書誌] H. Ueda et al.: "Interaction of a lectin from Psathyrella velutina mushroom with N-acetylneuraminic acid"FEBS Lett.. 448. 75-80 (1999)
[文献書誌] H. Ueda et al.: "Multispecificities of a Psathyrella velutina mushroom lectin: Binding toward heparin/pectin is exhibited by a site different from its N-acetylglucosamine/N-acetylneuraminic acid-specific side"J. Biochem.. 126. 530-537 (1999)
[文献書誌] H. Ueda et al.: "Multispecificities of the N-acetylglucosamine binding lectin from a mushroom, Psathyrella velutina mushroom toward acidic glycoconjugates"Nat. Sci. Rept.. Ochanomize Univ. Tokyo. 50. 31-45 (1999)
[文献書誌] H. Ueda et al.: "Glycobiology of the plant glycoprotein epitope: Structure, Immunogenicity and allergenicity of plant glycotopes"Trend in Glycoscience and Glycotechnology. 11・62. 405-420 (1999)
[文献書誌] 小川温子、岩城はるひ: "池田康夫、丸山征郎編「血小板生物学」"株式会社メディカルレビュー社 (印刷中). (2000)
[文献書誌] 編集:小川温子: "TIGG特集号 "Biology of Carbohydrate Epitopes : Glycotopes""有限会社学進出版. 138 (1999)

1999 年度 実績報告書

急性期糖鎖による細胞外マトリックス分子の活性制御と組織修復における役割

研究代表者

小川 温子 お茶の水女子大学, 人間文化研究科, 助教授 (90143700)

研究成果

[文献書誌] H. Uchibori-Iwaki et al.: "The changes in glycosylation after partial hepatectomy enhance collagen binding of vitronectin in plasma"Glycobiology. (印刷中). (2000)

[文献書誌] H. Ueda et al.: "Interaction of a lectin from Psathyrella velutina mushroom with N-acetylneuraminic acid"FEBS Lett.. 448. 75-80 (1999)

[文献書誌] H. Ueda et al.: "Multispecificities of a Psathyrella velutina mushroom lectin: Binding toward heparin/pectin is exhibited by a site different from its N-acetylglucosamine/N-acetylneuraminic acid-specific side"J. Biochem.. 126. 530-537 (1999)

[文献書誌] H. Ueda et al.: "Multispecificities of the N-acetylglucosamine binding lectin from a mushroom, Psathyrella velutina mushroom toward acidic glycoconjugates"Nat. Sci. Rept.. Ochanomize Univ. Tokyo. 50. 31-45 (1999)

[文献書誌] H. Ueda et al.: "Glycobiology of the plant glycoprotein epitope: Structure, Immunogenicity and allergenicity of plant glycotopes"Trend in Glycoscience and Glycotechnology. 11・62. 405-420 (1999)

[文献書誌] 小川温子、岩城はるひ: "池田康夫、丸山征郎編 「血小板生物学」"株式会社 メディカルレビュー社 (印刷中). (2000)

[文献書誌] 編集:小川温子: "TIGG特集号 "Biology of Carbohydrate Epitopes : Glycotopes""有限会社 学進出版. 138 (1999)

1999 年度実績報告書

小川温子お茶の水女子大学, 人間文化研究科, 助教授 (90143700)

[文献書誌] 小川温子、岩城はるひ: "池田康夫、丸山征郎編「血小板生物学」"株式会社メディカルレビュー社 (印刷中). (2000)

[文献書誌] 編集:小川温子: "TIGG特集号 "Biology of Carbohydrate Epitopes : Glycotopes""有限会社学進出版. 138 (1999)