放射線発がんにおけるDNA障害チェックポイント機構の役割

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11138250
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 中西 真 名古屋市立大学, 医学部, 助教授 (40217774)
• キーワード: 細胞周期 / チェックポイント / Cdc25 / Chk1 / Cds1 / Cdc2 / 細胞分裂 / DNA障害

研究概要

分裂酵母において様々なチェックポイント機構に重要な役割を果たしていると考えられているChk1およびCds1の哺乳動物細胞における作用機構を解明するために、hChk1およびhCDS1の各細胞周期チェックポイントおよびスピンドルチェックポイントでリン酸化を受け、またCds1がDNA障害チェックポイントにおいてリン酸化を受けて活性化されることが明らかとなった。興味あることにCds1の発現は野生型p53により負に制御されており、p53欠損ガン細胞における抗ガン剤耐性に役割を果たしていると予想された。一方、Chk1のノックアウトマウスの解析から、Chk1は初期胚の発生に必要不可欠であり、Chk1-/-マウス卵はDNA複製チェックポイント機構の欠損によると思われる、異常微小核が認められた。このChk1-/-マウスは胎生期E3.5日ほどから異常が見られ、子宮内に着床はするもののほとんど胎児由来の細胞増殖を認めなかった。また、Chk1-/-マウス卵は、DNA障害に反応した細胞周期停止を起こさず、DNA障害チェックポイント機構にも異常が認められた。現在、Cds1ノックアウトマウスはES細胞内へのターゲティングベクターの導入が終わり、薬剤選択中である。さらに、DNA障害チェックポイント活性化時におけるアポトーシス回避の分子機構を明らかにする新規キナーゼを同定した。さらにこのキナーゼは様々な増殖因子依存的に活性化されて、NF-kBの活性化制御の中心をなすIKK複合体を活性化することを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Kaneko, Y.: "Cell-cycle-dependent and ATM-independent expression of human Chk1 kinase"Oncogene. 18. 3673-3681 (1999)
• [文献書誌] Nakanishi, K.: "Dual intracellular recording of neocortical neurons in a neuron-glia co-culture system"Brain Res. Protocol.. 4. 105-114 (1999)
• [文献書誌] Nakanishi, M.: "Direct interaction of p21 cyclin-dependent kinase inhibitor with the retinoblastoma tumor suppressor protein"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 263. 35-40 (1999)
• [文献書誌] Kaneko, Y.: "Phorbol ester inhibits DNA damage-induced apoptosis in U937 cells through activation of protein kinase C"Life Science. 65. 2251-2258 (1999)
• [文献書誌] Tominaga, K.: "Role of human Cds1 (Chk2) kinase in DNA damage checkpoint and its regulation by p53"J. Biol. Chem.. 274. 31463-31467 (1999)
• [文献書誌] Kitamura, K.: "Characterization of the human dihydropyrimidinase-related protein 2 (DRP-2) gene"DNA Res.. 6. 291-297 (1999)
• [文献書誌] Mitsui, K.: "A novel human gene encoding HECT domain and RCC1-like repeats interacts with cyclins and is potentially regulated by the tumor suppressor proteins"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 266. 115-122 (1999)
• [文献書誌] Morisaki, H.: "Complex mechanisms underlying impaired activation of Cdk4 and Cdk2 in replicative senescence: roles of p16, p21, and cyclin D1"Exp. Cell. Res. 253. 503-510 (1999)
• [文献書誌] Ogawa, K.: "Aberrant expression of p27(Kip1) is associated with malignant transformation of the rat urinary bladder epithelium"Carcinogenesis. 21. 117-121 (2000)
• [文献書誌] Takahashi, H.: "Cdk4 activation is dependent on the subunit rearrangement in the complexes"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 267. 388-393 (2000)
• [文献書誌] Fuse, T.: "p27Kip1 expression by contact inhibition as a prognostic index of human glioma"J. Neurochem.. (in press). (2000)
• [文献書誌] Akita, H.: "Induction of KAI-1 Expression in Metastatic Cancer Cells by Phorbol Esters"Cancer letters. (in press). (2000)
• [文献書誌] Tojima, A.: "NAK in an I Kappa B Kinase-activationg kinase"Nature. (in press). (2000)