| 研究概要 |
本研究において以下の点を明らかにした。
1.胃癌細胞株KATOIIIにBax・コントロール・Bcl-2発現ベクターを安定導入した細胞株を作製し、抗癌剤(5-fluororacil,doxorubicin,paclitaxel)に対する感受性を検索した。Bax安定導入株は高感受性を示し、Bcl-2安定導入株は耐性であり、この機序としてmitochondriaからのcytochrome c放出レベルの相違がWestern blotで示された。
2.Bax過乗発現のみによるapoptosis誘導はBax遺伝子にmutationをもつJurkat細胞で報告されているが、野生型Baxをもちproapoptotic Bax蛋白を発現している白血病細胞株K562においてもapoptosisが誘導されることをTet-On systemによるBax発現系安定導入にて証明した。この系でのapoptosisはpancaspase inhibitor(zVAD-fmk)により阻害され、cytochrome cを介しないcaspase活性化経路が示唆された。
3.proapoptotic Bax蛋白を発現している大腸癌細胞株DLD-1にTet-On systemによるBax発現系を安定導入した細胞ではBax発現誘導のみでは10数%のapoptosisしか誘導できなかったが、apoptosisの機序はcytochrome cを介していると考えられ、抗癌剤(5-fluorouracil,cisplatinum,paclitaxel,doxorubicin)によるapoptosisは、Bax過剰発現時はコントロールに比べ増幅された。
以上のことよりBax遺伝子導入による癌細胞の抗癌剤感受性増強効果は、親株のBax遺伝子の性状にかかわらず、またBax過剰発現のみによるapoptosis誘導効果のレベルにかかわらず認められることが確認され、Bax遺伝子の腫瘍特異性遺伝子治療への有用性が示された。
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