1999 年度実績報告書

線条体由来蛋白性物質によるドーパミンニューロン死の制御

研究課題

研究課題/領域番号	11157213
研究機関	京都大学
研究代表者	赤池昭紀京都大学, 薬学研究科, 教授 (80135558)
研究分担者	久米利明京都大学, 薬学研究科, 助手 (10303843) 香月博志京都大学, 薬学研究科, 助教授 (40240733)
キーワード	一酸化窒素 / グルタミン酸 / 神経細胞死 / 神経保護因子 / ステロイド / 線条体条件培地 / 胎仔血清 / パーキンソン病
研究概要	これまで我々は、グルタミン酸-NO系により誘発されるドーパミンニューロン死を抑制する内在性物質を探索する目的で、培養線条体細胞条件培地および牛胎仔血清(FCS)に含まれる神経保護活性物質の探索を行った。細胞の供給が容易な培養大脳皮質細胞系を用いてグルタミン酸神経毒素に対する作用を検討したところ、その神経保護活性成分はエーテルにより容易に抽出されることを見出した。さらに、条件培地に添加されている牛胎仔血清(FCS)のエーテル抽出も、培養線条体細胞エーテル抽出物よりは弱いながらも有意な保護作用を示すことを見出した。FCSエーテル抽出物がグルタミン酸を抑制するとともにNOドナーのS-nitrosocysteine(SNOC)誘発神経毒性も抑制することから、SNOC神経毒性に対する作用に注目して精製を試みた結果、SNOCおよびグルタミン酸の神経毒性を強力に抑制する分画を得ることに成功した。得られた分画をマススペクトリー法により分析したところ、ほぼ単一の成分に分離されており、その成分の分子量が382であることが明らかになった。本成分のMS/MSによる解析の結果より、既知のステロイドホルモンとは分子量、化学構造が異なる新規ステロイド化合物であることが推定された。FCSに含まれる本化合物の推定濃度は1mg/Lであった。含量が少なく通常のNMRによる解析に供するだけのサンプルを得ることができなかったため、プロトンNMR解析および精密分子量解析を行うことにより、化学組成を決定するとともにステロイド骨格及び置換基の構造に関するデータを得た。その結果、本化合物は水分子が容易にはずれることから分子量382と364の2種類の化学構造の間を容易に遷移すること、ステロイド骨格の3位、4位および17位に特有の置換基が結合していることが明らかになった。本化合物には17位をはじめとして立体配置が不明な不斉炭素が少なくとも2カ所あり、その立体構造の詳細を検討中であるが、新規の神経保護性ステロイドとしてニューロン死の制御に重要な役割を持つことが期待される。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Akaike, A. et al: "Reactive oxygen species in NMDA receptor-mediated glutamate neurotoxicity"Parkinsonism and Related Disorders. 5. 203-207 (1999)
[文献書誌] Ibi, M. et al: "Depletion of intracellular glutathione increases susceptibility to nitric oxide in mesencephalic dopaminergic neurons"J. Neurochem.. 73. 1696-1703 (1999)
[文献書誌] Imura, T. et al: "Differential expression of small heat shock proteins in reactive astrocytes after focal ischemia : possible role of β-adrenergic receptor"J. Neurosci.. 19. 9768-9779 (1999)
[文献書誌] Kaneda, K. et al: "Apoptotic DNA fragmentation of Bax induced by transient ischemia of the rat retina"Brain Res.. 815. 11-20 (1999)
[文献書誌] Kihara, T. et al: "Effects of nicotinic receptor agonists on beta-amyloid beta-sheet formation"Jpn. J. Pharmacol.. 79. 393-396 (1999)
[文献書誌] Shimazu, S. et al: "Deprenyl rescues dopaminergic neurons in organotypic slice cultures of neonatal rat encephalon from N-methyl-D-aspartate toxicity"Eur. J. Pharmacol.. 377. 29-34 (1999)
[文献書誌] 赤池昭紀: "最新医学"神経細胞の生存・分化・死と神経疾患. 7 (1999)
[文献書誌] 赤池昭紀: "日薬理誌"ラジカルストレスに対するニューロンの応答. 7 (1999)

1999 年度 実績報告書

線条体由来蛋白性物質によるドーパミンニューロン死の制御

研究代表者

赤池 昭紀 京都大学, 薬学研究科, 教授 (80135558)

研究成果

[文献書誌] Akaike, A. et al: "Reactive oxygen species in NMDA receptor-mediated glutamate neurotoxicity"Parkinsonism and Related Disorders. 5. 203-207 (1999)

[文献書誌] Ibi, M. et al: "Depletion of intracellular glutathione increases susceptibility to nitric oxide in mesencephalic dopaminergic neurons"J. Neurochem.. 73. 1696-1703 (1999)

[文献書誌] Imura, T. et al: "Differential expression of small heat shock proteins in reactive astrocytes after focal ischemia : possible role of β-adrenergic receptor"J. Neurosci.. 19. 9768-9779 (1999)

[文献書誌] Kaneda, K. et al: "Apoptotic DNA fragmentation of Bax induced by transient ischemia of the rat retina"Brain Res.. 815. 11-20 (1999)

[文献書誌] Kihara, T. et al: "Effects of nicotinic receptor agonists on beta-amyloid beta-sheet formation"Jpn. J. Pharmacol.. 79. 393-396 (1999)

[文献書誌] Shimazu, S. et al: "Deprenyl rescues dopaminergic neurons in organotypic slice cultures of neonatal rat encephalon from N-methyl-D-aspartate toxicity"Eur. J. Pharmacol.. 377. 29-34 (1999)

[文献書誌] 赤池昭紀: "最新医学"神経細胞の生存・分化・死と神経疾患. 7 (1999)

[文献書誌] 赤池昭紀: "日薬理誌"ラジカルストレスに対するニューロンの応答. 7 (1999)

1999 年度実績報告書

赤池昭紀京都大学, 薬学研究科, 教授 (80135558)