インテグリンを介した単球/マクロファージの細胞運動性制御機構の解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11158222
• 研究機関: (財)大阪バイオサイエンス研究所
• 研究代表者: 佐邊 壽孝 財団法人 大阪バイオサイエンス研究所, 第1研究部, 研究部長 (40187282)
• 研究分担者: 橋本 茂 財団法人 大阪バイオサイエンス研究所, 第1研究部, 研究員 (50311303)
• キーワード: インテグリン / パキシリン / 単球細胞 / PAGs / ARFGAP / 細胞運動性

研究概要

成熟単球cDNA libraryをパキシリンをプロープとしfar-western法にてスクリーニングし、パキシリン結合性蛋白質cDNAを単離同定した。その結果、ARFGAPを示す新規蛋白質が得られた。我々は、成熟単球細胞以外でもパキシリン結合性蛋白質の精製やfar-western法による同定を行っているが、同様にARFGAP活性示す別の蛋白質が得られている。我々は、これら一群の蛋白質をPAGs(Paxillin-associated ARFGAP proteins)と命名し、今回成熟単球から得られたものをPAG3と命名した。
我々は、単球の成熟に伴ってパキシリンが発現誘導されチロシンリン酸化されることを明らかにしているが、PAG3もこの過程で発現誘導、チロシンリン酸化され、成熟単球において、主に細胞形質膜辺縁部にパキシリンを共局在した。ARFは哺乳類では6種のアイソフォームが存在し、小胞/膜/蛋白質の輸送やアクチン細胞骨格の再構成に関与することが知られている。PAG3はARF6に対するGAP(GTPase-activating protein)として機能することを明らかにすると共に、その強制発現は、パキシリンの細胞接着点への集積と細胞運動性とに対し、阻害的に働くことを明らかにした。さらに、PAG3はヒト動脈硬化病変における泡沫細胞に高レベル発現している可能性を示唆する観察結果も得ている。

研究成果

• [文献書誌] Y.Mazaki .,et al.: "Paxillin isoforms in mice : lack of the γisoform, and developmentally specific βisoform expression"J. Biol. Chem.. 273. 22435-22441 (1998)
• [文献書誌] N.Nishiya .,et al.: "The LIM domain of hic-5 porotein recoginize specific DNA fragments in a zinc-dependent manner in vitro"Nucl. Acid. Res.. 26. 4267-4273 (1998)
• [文献書誌] T.Maruyama .,et al.: "Activation of c-Src kinase is associated with in vitro decidualization of human endometrial stromal cells"Endocrinology. 140. 2632-2636 (1999)
• [文献書誌] N.Takahashi .,et al.: "Vascular-endothelial growth factor (VEGF) induces activation and subcellular translocation of focal adhesion kinase (pp125FAK) in cultured rat cardiac myocytes"Circ. Res.. 84. 1194-2202 (1999)
• [文献書誌] T.Maruyama .,et al.: "Tyrosine phosphorylation and subcelluar localization of focal adhesion proteins during in vitro decidualization of human endometrial stromal cells"Endocrinology. 140. 5982-5990 (1999)
• [文献書誌] T.Hiiragi .,et al.: "Transglutaminase type 1 and its cross-linking activity are concentrated at adherens junctions in simple epithelial cells"J. Biol. Chem.. 274. 34148-34154 (1999)
• [文献書誌] Y.Seko .,et al.: "Hypoxia Induces Activation and Subcellular Translocation of Focal Adhesion Kinase (p125(FAK)) in Cultured Rat Cardiac Myocytes"Biophy. Biochem. Res. Com.. 262. 290-296 (1999)
• [文献書誌] A.Ito .,et al.: "A truncated isoform of PP2A promotes cell motility through paxillin phosphorylation"EMBO J.. 19. 562-571 (2000)
• [文献書誌] A.Kondo .,et al.: "A new paxillin-binding protein, PAG3/Papa/KIAA0400, bearing an Arf GTPase-activating protein activity is involved in paxillin recruitment to focal adhesions and cell migration"Mol. Biol. Cell. (印刷中).