染色体装置間の統合とその破綻による細胞の老化

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11239203
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 菊池 韶彦 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40283428)
• 研究分担者: 紅 朋浩 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (00222513) ; 鈴木 元 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (80236017) ; 中川 善之 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (10155690)
• キーワード: トポイソメラーゼ / クロマチンリモデリング / ヌクレオソーム構築 / SIR複合体 / CDC13 / テロメア / カンジダ酵母 / アスペルギルス

研究概要

この研究課題ではヌクレオソーム形成因子、クロマチンリモデリング因子など、核内の機能装置を階層ごとに分けて研究を進め、DNAトポイソメラーゼはそれらの階層すべての構築に関与しており、異なる階層間を繋ぐ因子として研究の1つの標的としている。今回は、トポIIα及びトポIIβをsiRNAによりそれぞれノックダウンしたところ、染色体の凝縮、娘細胞への分配、脱凝縮(核膜の形成)には影響せず、娘核がDNAのファイバーで結合している状態で、停止している細胞が見られた。少なくとも、トポIIαは分裂期染色体スカッフォルドとして必須ではなかった。
RSC58遺伝子の産物は、クロマチンリモデリング複合体の1成分と同定されており、生育に必須である。今回その温度感受性変異株を作成し機能解析を行った。マルチコピーサプレッサーとしては転写因子であるSWI6、Two Hybrid ScreeningではRSC複合体の別の成分であるRSC4が得られた。
また、酵母のhtr1欠失変異ではSIR複合体がテロメア領域に蓄積するため、高温での生育阻害が起こり、HU感受性となる。ところがSIR複合体の成分であるSIR2、SIR3、SIR4のいずれか一つを欠失させると、この阻害は解除され高温での生育が可能になる事がわかった。同様に、テロメア領域の機能に関わるcdc13温度感受性変異株は、32℃では生育できないが、SIR2、SIR3、SIR4のいずれか一つを欠失させる事により、32℃での生育が可能になった。

研究成果

• [文献書誌] K.MATOBA, k.MAYANAGI, S.NAKASU, A.KIKUCHI, K.MORIKAWA: "Tree-dimentional electron microscopy of the reverse gyrase from Sulfolobus tokodai"Biochem.Biophys.Res.Comm.. 297. 749-755 (2002)
• [文献書誌] A.WATANUKI, S.OHWADA, T.FUKUSATO, F.MAKITA, T.YAMADA, A.KIKUCHI, Y.MORISHITA: "Prognostic significance of DNA topoisomerase IIα expression in human hepatocellular carcinoma"Anticancer Res.. 22. 1113-1120 (2002)
• [文献書誌] A.SAKAGUCHI, M.MIYAIKE, K.KURODA, N.NOZAKI, M.TANAKA, M.HIBINO, Y.FUJII, S.KATO, A.KIKUCHI: "Epitope distribution of randomely established monoclonal antibodies against human type II DNA topoisomerase"J.Biochem.. 132. 109-116 (2002)
• [文献書誌] T.KANBE, T.HORII, T.ARISHIMA, M.OZEKI, A.KIKUCHI: "PCR-based identification of pathogenic Candida species using primerl mixes specific to Candida DNA topoisomerase II genes"YEAST. 19. 973-989 (2002)
• [文献書誌] T.KANBE, K.YAMAKI, A.KIKUCHI: "Identification of the pathogenic Aspergillus species by nested PCR using a mixture of specific primers to DNA topoisomerase II gene"Microbiol.Immunl.. 46. 841-848 (2002)
• [文献書誌] K.-H.KIM, T.KANBE, T.AKASHI, I.MIZUGUCHI, A.KIKUCHI: "Identification of a single nuclear localization signal in the C-terminal domain of an Aspergillus DNA topoisomerase II"Mol.Genet.Genom.. 268. 287-297 (2002)