ADAMファミリーメンバーのクローニングと機能解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11240205
• 研究種目: 特定領域研究(B)
• 研究機関: 大分医科大学
• 研究代表者: 山本 俊輔 大分医科大学, 医学部, 教授 (90040188)
• 研究分担者: 泥谷 直樹 大分医科大学, 医学部, 助手 (80305036) ; 松浦 恵子 大分医科大学, 医学部, 助手 (00291542) ; 樋口 安典 大分医科大学, 医学部, 助教授 (60040284)
• キーワード: ADAM / CD156 / 単クローン抗体 / AD56 / ADAM15

研究概要

ADAM17に関する研究:ヒトとマウスADAM17(TNF-α converting enzyme、TACE)にに対するmAbを作成し、それらを用いて単球での恒常的発現と活性化された好中球における細胞膜表面での出現を明らかにした。また、Concanavalin AやIL-2で刺激されたCD4^+CD8^+T細胞において陽性細胞増加が見られ、NK細胞の多くもADAM17陽性であった。ヒトの特発性間質性肺炎では肺胞壁のマクロファージ(Mφ)と好中球に、慢性関節リウマチでは滑膜下Mφに局在した。マウスではPropionibacterium acnes注射後の肺や肝の肉芽腫内Mφと好中球に発現を認めた。
ADAM15(AD56)に関する研究:マウス分子の遺伝子が21個のエクソンからなることを明らかにするとともに、5'上流に種々の転写調節候補配列の存在を示した。また、LPSやサイトカイン刺激によりその遺伝子発現の亢進を観察した。未刺激胸腺T細胞での発現は陰性であるが、Concanvalin AやIL-2刺激後強く発現し、発現細胞はCD4^+CD8^+あるいはCD4^+CD8^-細胞に限られていた。正常マウスでは、脳の錐体細胞とPurkinje細胞、骨髄の巨核球、myeloid細胞、erythroid細胞、脾臓の巨核球、単核球、腎集合管上皮細胞、副腎網状帯細胞、心筋細胞などが強く免疫染色された。
ADAM-8(CD156)に関する研究:マウスADAM8(CD156)は腹腔レジデントMφで発現しており、LPS刺激で陽性細胞の増加を観察した。同様に好中球にも発現があり、LPS刺激により陽性好中球が増加した。
新規のADAM分子のクローニング:2種類の新しいcDNAフラグメントを検出した。そのうちの一つ(89-2-2)はzinc-binding siteとしてのコンセンサス配列を持ち、プロテアーゼの可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Tamura, Y.他: "CD14 transgenic mice expressing membrane and soluble forms"Int. Immunol.. 11(3). 333-339 (1999)
• [文献書誌] Hisaka, H.他: "Close localization of mouse CD14 and CD32/16 in the cell surface of"Pathobiology. 67(2). 92-97 (1999)
• [文献書誌] Yamamoto, S.他: "ADAM family proteins in immune system"Immunol. Today. 20(5). 278-284 (1999)
• [文献書誌] Ohki, K.他: "Suppressive effects of serum on the LPS-induced production of nitric oxide"Immunol. Cell. Biol.. 77(2). 143-152 (1999)
• [文献書誌] Yamamoto, T.他: "Expression of scavenger receptor class A and CD14 in lipopolysaccharide-"Pathol. Int.. 49(11). 983-992 (1999)
• [文献書誌] 山本俊輔他: "エンドトキシンショック"病理と臨床(臨時増刊号). 17. 320 (1999)
• [文献書誌] 山本俊輔: "自然免疫鳥瞰ー一次防御、および獲得免疫の支持と利用"Molecular Medicine. 36(5). 468-474 (1999)
• [文献書誌] 山本俊輔: "LPS臓器障害とマクロファージ"病理と臨床. 169,(). 1100-1111 (1999)
• [文献書誌] Yoshiyama, K.他: "CD156(human ADAM8): expression, primary amino acid sequence, and"Genomics.. 41(1). 56-62 (1997)
• [文献書誌] Takai, N.他: "Primary structure of rat CD14 and characteristics of rat CD14, cytokine"J. Leuko. Biol.. 61(6). 736-744 (1997)
• [文献書誌] Shinji, H.他: "Lipopolysaccharide-induced biphasic inositol 1, 4, 5-triphosphate response"J. Immunol.. 158(2). 1370-1376 (1997)
• [文献書誌] Kataoka, M.他: "Structure of the murine CD156 gene, characterization of its promotor"J. Biol. Chem.. 272(29). 18209-18215 (1997)
• [文献書誌] Shinji, H.他: "Lipopolysaccaride-induced biphasic inositol 1. 4, 5-triphosphate response"J. Immunol.. 158(2). 1370-1376 (1996)
• [文献書誌] Onozuka, K.他: "Participation of CD14 in the phagocytosis of smooth-type Salmonella"Microbiol. Immunol.. 41(10). 765-772 (1997)
• [文献書誌] Kirikae T.他: "Rhodobacter spheroides diphosphoryl lipid A inhibits interleukin-6"J. Endotox. Res.. 4(2). 115-122 (1997)
• [文献書誌] Morita, H.他: "Difference in clearance of exogenously administered smooth-form LPS"J. Endotox. Res.. 4(6). 415-423 (1997)
• [文献書誌] 樋口安典他: "CD14トランスジェニックマウス"臨床免疫. 29(11). 1345-1350 (1997)
• [文献書誌] Haziot, A.他: "Resistance to endotoxin shock and reduced dissemination of Gram-negative"Immunity. 4(4). 407-414 (1996)
• [文献書誌] 山本俊輔他: "CD156(ADAM 8)の構造、機能およびファミリー"Molecular Medicine34(臨時増刊号)免疫1997-98. 148-162 (1997)
• [文献書誌] Matsuura, K.他: "Involvement of CD14 in LPS-induced liver"Wiley-Liss. in press (1999)
• [文献書誌] Yammoto, S.他: "Roles of CD14 in LPS signaling and scavenging: studies using CD14-"Weiley-Liss. 8 (1998)
• [文献書誌] Higuchi, Y.: "CD156 (ADAM 8) workshop panel report. Leukocyte Typing VI."Garland Publ Inc. 3 (1998)
• [文献書誌] Kataoka, M.: "Generation and analysis of CD14-transgenic mice. Leukocyte Typing VI."Garland Publ Inc. 2 (1998)
• [文献書誌] Takai, N.他: "Structure of rat CD14, and expression of rat CD14 and cytokines"Oxford Univ. Press. 3 (1998)
• [文献書誌] Kataoka, M.他: "Generation and analysis of CD14-transgenic mice"Oxford Univ. Press. 2 (1998)
• [文献書誌] 片岡晶志: "エンドキシン感受性亢進および低下マウス"菜根出版. 12 (1998)