I型ヘルパーT細胞の誘導によるトキソプラズマ病の制御

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11306019
• 研究機関: 帯広畜産大学
• 研究代表者: 見上 彪 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (20091506)
• 研究分担者: 玄 学南 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (10292096) ; 五十嵐 郁男 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (80159582) ; 長澤 秀行 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (60172524) ; 宮沢 考幸 東京大学, 農学部, 助手 (80282705) ; 高橋 英司 東京大学, 農学部, 教授 (50183439)
• キーワード: T.gondii / Th1細胞 / サイトカイン / ウイルスベクター / ネコIFN-γ / ネコIL-12

研究概要

細胞内寄生原虫であるT.gondiiによるトキソプラズマ病の発症を抑えるには細胞性免疫を誘導するI型ヘルパーT細胞(Th1細胞)の誘導が重要であることが示唆されている。そこで、本研究は細胞性免疫によるトキソプラズマ病の感染防御機構を解明することを目的に以下の基本手順で実施される。1)Th1細胞を誘導するサイトカイン(IL-2、IL-12、IFN-γ)とTh2細胞を誘導するサイトカイン(IL-4、IL-10)を大量に発現する。2)それぞれのサイトカイン、あるいはその組み合わせをFIV/T.gondii感染猫に投与し、トキソプラズマ制御におけるサイトカインならびにTh1細胞の役割を詳細に検討する。3)細胞性免疫が誘導できかつ外来遺伝子を挿入可能なFHV-1をベクターとし、これらTh1細胞誘導サイトカインとT.gondii由来抗原を発現させる組換えFHV-1を作製し、ワクチン効果及びトキソプラズマ病の制御能を検討する。本年度までに得られた主な成績は以下の通りである。
1)T.gondiiのBeverley株を用いて、ネコの実験感染系を確立した。2)ネコ体内での虫体を検出するための高感度のPCR法を確立した。3)ネコ体内での特異抗体を検出するための高感度の血清学診断方法を確立した。4)Beverley株より主要抗原P22、P24、P30、P43、P54、SUS1などの遺伝子をクローニングし、その全塩基配列を解析した。5)主要抗原P22、P30、P54などの遺伝子をネコヘルペスウイルス1型に挿入するために、それぞれのトランスファーベクターを構築した。

研究成果

• [文献書誌] Koyama,T., et al.: "Antigen expressed in feline enteroepithelial-stages parasites of Toxoplasma gondii."J.Vet.Med.Sci.. 62・10. 1089-1092 (2000)
• [文献書誌] Seng,S., et al.: "Expression of SAG-1 of Toxoplasma gondii in transgenic mice."Parasitol.Res.. 86・4. 263-269 (2000)
• [文献書誌] Tanaka,T., et al.: "The role of CD4+ or CD8+ T cells in the protective immune response of BALB/c mice to Neospora caninum infection."Vet.Parasitol.. 90・3. 183-191 (2000)
• [文献書誌] Imamura,T., et al.: "Cloning of full length cDNA, high-level expression and biological characterization of feline IL12."J.Vet.Med.Sci.. 62・10. 1079-1087 (2000)
• [文献書誌] Nishikawa,Y., et al.: "Expression of canine interferon-beta by a recombinant vaccinia virus."FEBS Letters. 446・1. 179-182 (2000)
• [文献書誌] Nishimura,Y., et al.: "Molecular cloning of the cDNAs encoding the feline B-lymphocyte activation antigen B7-1 (CD80) and B7-2 (CD86) homologues which interact with human CTLA4-Ig."Eur.J.Immunogenetics. 27・. 427-430 (2000)