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2001 年度 研究成果報告書概要

細胞間透過性と細胞極性を規定する新しい細胞接着分子群クローディンファミリーの解析

研究課題

研究課題/領域番号 11307002
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 病態医化学
研究機関京都大学

研究代表者

月田 承一郎  京都大学, 医学研究科, 教授 (50155347)

研究分担者 古瀬 幹夫  京都大学, 医学研究科, 助教授 (90281089)
研究期間 (年度) 1999 – 2001
キーワードクローディン / タイトジャンクション / ZO-1 / ノックアウト / 裏打ち蛋白質 / PDZドメイン / 細胞接着 / バリアー
研究概要

(1)クローディンファミリーメンバーの同定・解析と特異抗体の作製:本研究会誌までに8種類のクローディンを同定していた。データベースを調べることにより、現在までさらに16種類のクローディンを見つけた。これらのクローディンのcDNAをRT-PCR法により単離した。また、得られたクローディンcDNAを用いて、細胞質ドメインのリコンビナント蛋白質を大腸菌で作製し、それを抗原にして、それぞれのクローディンに特異的なポリクローナル抗体とモノクローナル抗体を作り、それぞれのクローディンの発現パターンを染めつつある。
(2)TJの形成と機能におけるクローディンの役割:細胞レベルにおける解析:以下のクローディンの基本的な性質を明らかにした。クローディンに接着能力はあること。各クローディン間で接着特異性はあること。各クローディンが共重合してTJストランドを作ること。TJのバリアー機能に各クローディン間で差があること。
(3)TJの形成と機能におけるクローディンの役割:個体レベルにおける解析:各クローディンのゲノムを単離し、相同組み換えにより遺伝子破壊のためのベクターを作製し、各クローディンを欠失したマウスの作製を試みた。現在のところクローディン-1、2、3、5について解析が進んでいる。
(4)TJの裏打ち蛋白質とクローディンの相互作用の解析:クローディンとZO-1、ZO-2、ZO-3との結合について、in vivoおよびin vitroにおける解析を進めた結果、クローディンのC末端にZO-1、2、3のPDZ1ドメインが直接結合することが明らかになった。

  • 研究成果

    (14件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (14件)

  • [文献書誌] Morita, K.: "Claudin multigene family encoding four-transmembrane domain protein components of tight junction strands"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 96. 511-516 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Morita, K.: "Claudin-11/OSP-based tight junctions in myelinated sheaths of oligodendrocytes and in Sertoli cells in testis"J. Cell Biol.. 145. 579-588 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Tsukita, S.: "Occludin and claudins in tight junction strands ; Leading a supporting players?"Trends in Cell Biol.. 9. 268-273 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Furuse, M.: "Manner of anteraction of heterogenous claudins species within and between tight junction strands"J. Cell Biol.. 147. 891-903 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Morita, K.: "Endothelial claudin : Claudin-5/TMVCF constitutes tight junction strands in endothlial cells"J. Cell Biol.. 147. 185-194 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Furuse, M.: "Conversion of Zonula Occludentes from tight to leaky strand type by introducing claudin-2 into MPCK I cells"J. Cell Biol.. 153. 263-272 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Morita K., Furuse M., Fujimoto K., Tsukita Sh.: "Claudin multigene family encoding four-transmembrane domain protein components of tight junction strands"Proc. Natl. Acad. Sci. USA.. 96. 511-516 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Morita K., Sasaki H., Fujimoto K., Furuse M., Tsukita Sh.: "Claudin-11/OSP-based tight junctions in myelinated sheaths of oligodendrocytes and in Sertoli cells in testis"J.Cell Biol.. 145. 579-588 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Tsukita Sh., Furuse M.: "Occludin and claudins in tight junction strands : Leading or supporting palyers?"Trends in Cell Biol. 9. 268-273 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Furuse M., Sasaki H., Tsukita Sh.: "Manner of interaction of heterogenous claudin species within and between tight junction strands"J.Cell Biol.. 147. 891-903 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Sonoda N., Furuse M., Sasaki H., Yonemura S., Katahira J., Horiguchi Y., Tsukita Sh.: "Clostridium perfringens enterotoxin fragment removes specific claudins from tight junction strands : Evidence for direct involvement of claudins in tight junction barrier"J.Cell Biol.. 147. 195-204 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Furuse M., Furuse K., Sasaki H., Tsukita Sh.: "Conversion of Zonula Occludentess from tight to leaky strand type by introducing claudin-2 into MDCKI cells"J.Cell Biol.. 153. 263-272 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Tsukita Sh., Furuse M., Itoh M.: "Multi-functional strands in tight junctions"Nat.Rev.Mol.Cell Biol.. 2. 285-293 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Furuse M., Hata M., Furuse K., Yoshida Y., Haratake A., Sugitani Y., Noda T., Kubo A., Tsukita Sh.: "Claudin-based tight junctions are crucial for the mammalian epidermal barrier : A lesson from claudin-1-deficient mice"J.Cell Biol.. (in press). (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 2003-09-17  

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