2000 年度実績報告書

細胞外マトリックスにおけるプロテオグライカンの代謝に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号	11307040
研究機関	東京医科歯科大学
研究代表者	柳下正樹東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (70132793)
研究分担者	PODYMA Katarzyna Anna 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教務職員 (90302877) 篠村多摩之東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (70206118)
キーワード	細胞外マトリックス / プロテオグライカン / ヘパラン硫酸 / 分解酵素 / ヘパラネース
研究概要	細胞外マトリックスは結合組織・支持組織の主要成分としての働きの他に、細胞を取り巻く環境として細胞の形態、発生、分化を初めとした様々な細胞代謝の調節因子でもある。プロテオグライカンは細胞外マトリックス中でコラーゲンと共に主要な構成成分として重要な働きをもっている。本年度は、細胞外マトリックス分解酵素のひとつであるヘパラネースを昨年度確立した精製法を用いて大量調製しその酵素学的性質をさらに詳細に解析した。また、ヘパラネースの分子クローニングから得られた遺伝子情報をもとに、細胞外マトリックス代謝過程におけるヘパラネースの役割を分析した。本年度得られた結果の要約は以下のとおりである。 1.ヘパラネースの基質特異性を昨年度に引き続き解析し切断部の糖鎖構造を解析した結果、この酵素はendo-β-glucuronidaseの一種であり、切断部から非還元末端側の糖鎖配列は-GlcUA-GlcNAc(or GlcNSO_3)-GlcUA-GlcNAc(±SO_3)-GlcUA-(切断端)であることが決定された。 2.モノクロナル抗体、ポリクロナル抗体の調製を引き続き行い、抗体の性質をウエスタンブロット法、組織染色法などを用いて精査中である。 3.ヘパラネースとGFPタンパクの融合タンパクをコードする発現ベクターを設計し、ヘパラネースの分泌と、細胞内局在に関する検索を行っている。 4.肺癌、食道癌、口腔扁平上皮癌の組織を用い、細胞外マトリックス分解過程、癌転移巣形成過程とがん細胞でのヘパラネース発現の間に相関性のあることを見い出し、そのメカニズムについて解析中である。

研究成果

(11件)

すべてその他

すべて文献書誌 (11件)

[文献書誌] Shibata,S.: "Isolation of Proteoglycon (versican) aggregate from rat dental pulp"Arch.Oral Biol.. 45. 563-568 (2000)
[文献書誌] 池田美子: "顎顔面領域発生の調節におけるヘパラン硫酸の関与"口腔病学会雑誌. 67. 94 (2000)
[文献書誌] Kaneko,S.: "Occulusal hypofunction causes a decrease of proteoglycans in rat periodontal ligament."J.Period.Res. (in press). (2000)
[文献書誌] Ogihara,Y.: "Biosynthesis of proteoglycans in Bone and Cartilage of Parathyroid Hormone-related peptide knock-out mouse"J.Bone Miner,Metab.. (in press). (2001)
[文献書誌] Ohashi,K.: "Affinity binding of heparin with β_2-microglobulin, and its enhancement of β_2 microglobulin amyloid fibrillogenesis"Am.J.Path.. (in press). (2001)
[文献書誌] Ikuta,M.: "Expression of heparanase in oral cancer cell lines and oral tissnes"Oral Oncology. (in press). (2001)
[文献書誌] Hashimoto-Uoshima,M.: "Effect of Interleukin 4 on the Proteoglycan Accumulation in Human Gingival Fibroblasts"J.Period, Res.. (in press). (2001)
[文献書誌] 柳下正樹(共著): "新歯学大事典"永未書店(in press). (2001)
[文献書誌] 柳下正樹(共著): "基礎生化学実験法第5巻"東京化学同人. 338 (2000)
[文献書誌] Yanagishita,M.(共著): "Proteoglycan Protocols"Humana Press (in press). (2001)
[文献書誌] Yanagishita,M.(共著): "Handbook of Glycosyltransferases and Their Related"Springer Verlag (in press). (2001)

2000 年度 実績報告書

細胞外マトリックスにおけるプロテオグライカンの代謝に関する研究

研究代表者

柳下 正樹 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (70132793)

研究成果

[文献書誌] Shibata,S.: "Isolation of Proteoglycon (versican) aggregate from rat dental pulp"Arch.Oral Biol.. 45. 563-568 (2000)

[文献書誌] 池田美子: "顎顔面領域発生の調節におけるヘパラン硫酸の関与"口腔病学会雑誌. 67. 94 (2000)

[文献書誌] Kaneko,S.: "Occulusal hypofunction causes a decrease of proteoglycans in rat periodontal ligament."J.Period.Res. (in press). (2000)

[文献書誌] Ogihara,Y.: "Biosynthesis of proteoglycans in Bone and Cartilage of Parathyroid Hormone-related peptide knock-out mouse"J.Bone Miner,Metab.. (in press). (2001)

[文献書誌] Ohashi,K.: "Affinity binding of heparin with β_2-microglobulin, and its enhancement of β_2 microglobulin amyloid fibrillogenesis"Am.J.Path.. (in press). (2001)

[文献書誌] Ikuta,M.: "Expression of heparanase in oral cancer cell lines and oral tissnes"Oral Oncology. (in press). (2001)

[文献書誌] Hashimoto-Uoshima,M.: "Effect of Interleukin 4 on the Proteoglycan Accumulation in Human Gingival Fibroblasts"J.Period, Res.. (in press). (2001)

[文献書誌] 柳下正樹(共著): "新歯学大事典"永未書店(in press). (2001)

[文献書誌] 柳下正樹(共著): "基礎生化学実験法第5巻"東京化学同人. 338 (2000)

[文献書誌] Yanagishita,M.(共著): "Proteoglycan Protocols"Humana Press (in press). (2001)

[文献書誌] Yanagishita,M.(共著): "Handbook of Glycosyltransferases and Their Related"Springer Verlag (in press). (2001)

2000 年度実績報告書

柳下正樹東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (70132793)