| 研究課題/領域番号 |
11307050
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
矯正・小児・社会系歯学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
雫石 聰 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (00028789)
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| 研究分担者 |
片岡 宏介 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (50283792)
小島 美樹 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (20263303)
永田 英樹 大阪大学, 歯学部附属病院, 講師 (50260641)
久保庭 雅恵 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (00303983)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2001
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| キーワード | 歯周病原性菌 / Porphyromonas gingivalis / Actinobacillus actinomycetemcomitans / Prevotella / 鉄 / ヘモグロビン / ビルレンス因子 / ヘモグロビン結合タンパク質 |
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| 研究概要 |
歯周病原性菌が生存・増殖するためには鉄が必要である。我々は、これまでに、Porphyromonas gingivalisはヘモグロビンを有効な鉄源として利用し、そのヘモグロビンレセプターはリジン特異的タンパク質分解酵素(KGP)の酵素活性領域と同一であることを明らかにした。本研究では、まず、種々の歯周病原性菌における鉄源としてのヘモグロビンの有効性を検討した結果、Actinobacillus actinomycetemocomitans, Prevotella intermediaおよびPrevotella nigrescensもヘモグロビンを有効な鉄源として利用できることが示された。各菌のヘモグロビンレセプターを同定した結果、A.actinomycetemcomitansは65kDa、P.intermediaは60kDa、P.nigrescensは41,56および59kDaの外膜タンパク質がヘモグロビンとの結合に関与することが明らかとなった。次に、KGPの塩基配列を基に種々のKGPフラグメントを作製し、ヘモグロビン結合能を調べた結果、KGP酵素活性領域のN末端領域に強い活性部位が存在することが明らかとなった。さらに、KGPを標的としたDNAワクチンを構築し、P.gingivalis感染に対する防御効果を検討した。マウスにDNAワクチンを週1回連続4週筋肉内注射し、血清中の抗原特異抗体価をELISA法により調べた結果、IgG抗体価の上昇がみられた。また、このDNAワクチンを注射したマウスは免疫していないマウスに比べ、P.gingivalis感染による死亡率が減少した。これらの結果から、KGPは酵素機能だけではなく、鉄獲得機能も有しており、このタンパク質を標的としたDNAワクチンはP.gingivalis感染防御に有効な手段となる可能性が示唆された。
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