イオンチャネルブロッカーの構造生物学的研究と創薬への展開

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11307053
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 嶋田 一夫 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 教授 (70196476)
• 研究分担者: 加藤 晃一 名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (20211849) ; 高橋 栄夫 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助手 (60265717)
• キーワード: NMR / イオンチャネル / 相互作用 / ゲーディングモディファイアー / 立体構造

研究概要

平成12年度の結果より得られたハナトキシンの立体構造をもとに、チャネル結合部位を構成していると予想されたアミノ酸残基を対象にして部位特異的変異を導入した。変異体の化学的合成は成功したものの、3箇所存在するジスルフィド結合を適切にかけるリフォールディング条件を見つけることができなかっため、ハナトキシン変異体の作成は中止した。しかしながら、ハナトキシンと同様のゲーティングモディファイアーであるグラムトキシンを測定対象として、^1H-NMRを用いた立体構造計算を行った。その結果、グラモトキシンの立体構造を求めることができた。得られた構造は、ハナトキシンとよく似たフォールディングを示した。したがって、グラモトキシンをベースとしてその機能をハナトキシン型に変更することおよびグラモトキシンにアミノ酸変異を導入しその活性を測定することを行う。

研究成果

• [文献書誌] Hideo Takahashi: "A Novel NMR Method for the Determination of the Interface of Large Protein-protein Complexes"Nature Struct.Biol. 7. 220-223 (2000)
• [文献書誌] Koichi Kato: "Structural Basis of the Interaction between IgG and Fc Receptors"J.Mol.Biol.. 295. 213-224 (2000)
• [文献書誌] Kazuyasu Shindo: "Backbone ^1H,^<13>C, and^<15> N resonance assignments of the anti-dansyl antibody Fv fragment"J.Biomol.NMR. 17. 357-358 (2000)
• [文献書誌] Ichio Shimada: "NMR Analysis of Interactions Between Bio-Macromolecules"Real-Time Analysis of Biomolecular Interactions (K.Nagata and H.Handa, ed.). 223-231 (2000)
• [文献書誌] Katsuyoshi Masuda: "Pairing of oligosaccharides in the Fc region of immunoglobulin G"FEBS Lett.. 473. 349-357 (2000)
• [文献書誌] Yoshiki Yamaguchi: "^1H and ^<13>C NMR assignments for the glycans in glycoproteins by using ^2H/^<15>C-labeled glucose as a metabolic precursor"J.Biomol.NMR. 18. 357-360 (2000)