ヘルペスウイルスをベクターとした動物の原虫病に対する組換えワクチンの開発

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11356009
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 見上 彪 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (20091506)
• 研究分担者: 壁谷 英則 日本大学, 生物資源科学部, 助手 (10318389) ; 丸山 総一 日本大学, 生物資源科学部, 助教授 (30181829) ; 酒井 健夫 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (50147667) ; 玄 学南 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (10292096) ; 長澤 秀行 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (60172524)
• キーワード: T.gondii / N.caninum / C.parvum / B.equi / ヘルペスウイルス / ベクターワクチン / 組換えワクチン

研究概要

本研究はヘルペスウイルスをベクターとした動物の原虫感染症に対する組換えワクチンを開発することを最終目的とし、以下の基本手順により実施される。1)各種病原性原虫のcDNAライブラリーを作製する。2)主要抗原遺伝子を検索し、クローニングする。3)それぞれに対応するヘルペスウイルスベクターに挿入し、種々組換えウイルスを構築する。4)組換えウイルスにより発現された各原虫タンパク質の抗原性と免疫原性が虫体由来のそのものと一致するか調べる。5)自然宿主における各種原虫感染症に対する組換えワクチンの感染・発症防御効果を総合的に検討する。本年度までに得られた主な成績は以下の通りである。
1)トキソプラズマ原虫:T.gondiiの病原性株と弱毒株の主要抗原(SAG1、SAG2、SAG3、GRA1、GRA2、GRA3、GRA4、ROP2)遺伝子の全塩基配列の比較検討を行い、また、SAG1、SAG2、SAG3、ROP2などの遺伝子をネコヘルペスウイルスベクターに挿入し、その発現産物の抗原性を確認した。2)ネオスポラ原虫:N.caninumの主要免疫原性タンパク質P36とP43遺伝子をイヌヘルペスウイルスベクターに挿入し、その発現産物の抗原性を確認した。3)クリプトスポリジウム原虫:C.parvumの主要免疫原性抗原P15とP23遺伝子を発現する組換えワクシニアウイルスを接種したマウスで特異的抗体の産生を確認した。4)バベシア原虫:B.equiの主要抗原P30、P34遺伝子をバキュロウイルスベクターに挿入し、その発現産物の抗原性を確認した。

研究成果

• [文献書誌] Nishikawa, Y., et al.: "Immunization of dogs with a canine herpesvirus vector expressing Neospora caninum surface protein,NcSRS2"Int.J.Parasitol.. 30・11. 1167-1171 (2000)
• [文献書誌] Mishima, M., et al.: "Construction of recombinant feline herpesvirus type 1 expressing Toxoplasma gondii surface antigen 1"Mol.Biochem.Parasitol.. 117・1. 103-106 (2001)
• [文献書誌] Fukumoto, S., et al.: "Identification and expression of a 50-kilodalton surface antigen of Badesia gibsoni and evaluation of its diagnostic potential in an enzyme-linked immunosorbent assay"J.Clin.Microbiol.. 39・7. 2603-2609 (2001)
• [文献書誌] Nishikawa, Y., et al.: "Expression of canine interferon-gamma by a recombinant vaccinia virus and its antiviral effect"Virus Res.. 75・2. 113-121 (2001)
• [文献書誌] Nishikawa, Y., et al.: "Protective efficacy of vaccination by recombinant vaccinia virus against Neospora caninum infection"Vaccine. 19・11. 1381-1390 (2001)
• [文献書誌] Mishima, M., et al.: "Recombinant feline herpesvirus type 1 expressing Toxoplasma gondii ROP2 antigen inducible protective immunity in cats"Parasitol.Res.. 88・2. 144-149 (2002)