| 研究課題/領域番号 |
11460041
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
加藤 暢夫 京都大学, 農学研究科, 教授 (50026556)
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| 研究分担者 |
由里本 博也 京都大学, 農学研究科, 助手 (00283648)
阪井 康能 京都大学, 農学研究科, 助教授 (60202082)
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| キーワード | メチロトローフ細菌 / Mycobacterium gastri / Bacillus subtilis / Bacillus brevis / ホルムアルデヒド固定経路 / ホスホヘキスロースリン酸シンターゼ / ホスホヘキスロイソメラーゼ |
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| 研究概要 |
1) Bacillus属メチロトローフのホルムアルデヒド固定酵素遺伝子群の解析
中度高温菌でメタノール資化能をもつBacillus brevis S1株より、ホルムアルデヒド固定に関与する酵素、ヘキスロースリン酸シンターゼ(HPS、rmpA)とホスホヘキスロイソメラーゼ(PHI、rmpB)の遺伝子を含むDNA断片(3kb)を見出し、大腸菌にクローニングした。その遺伝子配座は、グラム陽性メチロトローフ
Mycobacterium gastriのrmpA/rmpBおよび非メチロトローフ細菌であるBacillussubtilisのyckG/yckFと同様にオペロンを形成していた。しかし、M.gastriでは、そのオペロンの上流域に調節遺伝子(rmpR)が存在したが、Bacippus属細菌には相当する配列が検出できず、M.gastriとの顕著な相違を示した。現在、両菌株より当該調節遺伝子の探索を行っている。また、B.subtilisの調節遺伝子を考えられていたyckHをクローニングし、その遺伝子産物の機能の特定を検討している。
2)B.brevisのHPSおよびPHIの精製と諸性質
B.brevisHPSの推定一次構造は、B.subtilisと約60%の相同性を示した。B.brevis S1株のHPS/PHI遺伝子を形質転換した大腸菌JM109株では、両酵素遺伝子がSDS-PAGE上で顕著なバンドとして検出されるまでに発現しており、その無細胞抽出液より、両酵素を精製した。精製したHPSはM.gastriに比べて高い耐熱性を示したが、中温域での比活性は、むしろ低い比活性を有していた。
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