| 研究概要 |
本研究の目的は,遺伝性乳癌の原因遺伝子Brca2について,その生理機能を分子,細胞,個体レベルで解明して,乳癌の診断,予防,治療技術の発展に貢献することである。特にBrca2変異マウスの作製,Brca2解析の獣医学領域への展開,およびC末端領域とRad51との会合の意義の解明を目標として研究した。
1.Brca2変異マウスの作製
ジーンターゲティングにより胚性幹細胞(ES細胞)に変異を導入するため,ターゲティングベクターの構築を行った。これをES細胞に導入して変異細胞を得た。
2.イヌのBrca2およびRad51のクローニングおよび症例における解析
イヌBrca2のcDNAをRT-PCR法でクローニングし,全塩基配列を決定した。決定した配列は,データベースに登録した。イヌのBrca2については,ゲノム解析により一部の配列について既に報告されていたが,その配列とことなる配列も数カ所認められ,Brca2に多形が存在する可能性が示された。また,症例におけるBrca2の変異解析を行うため,Protein trancation testの検査系の開発に取り組み,Brca2モチーフを含む一部の領域について開発に成功した。
3.ネコのBrca2のクローニング
ネコのBrca2について,2kb程度のクローニングと塩基配列の読解に成功した。
4.Brca2とRad51との会合
イヌのBrca2とRad51について行った。ヒトのBrca2ではその中央部分がRad51と会合することが報告されているが,それとは対照的にイヌBrca2はそのC末端領域でRad51と会合することが判明した。
|
