| 研究概要 |
本研究の目的は,Brca2を中心とした癌関連遺伝子について、生理機能を分子,細胞,個体レベルで解明して,乳癌の診断,予防,治療技術の発展に貢献することである。特にBrca2とRad51との相互作用およびその意義の解明、Brca2解析の獣医学領域への展開,および新規lkB分子MAILの生理機能の解明を目標として研究した。
1.イヌBrca2のクローニングと乳腺腫瘍症例における解析
イヌBrca2のcDNAめ全長をクローニングして塩基配列を決定した。また、症例におけるBrca2の変異解析を行うため,10kbにおよぶcDNAの全長を安定して増幅させるPCR法を開発した。さらに、Brca2遺伝子で最大であるエキソン11について、in vitro転写翻訳系を用いたProtein trancation testの検査系の開発に成功し、症例における変異解析を行った。
2.ネコのBrca2のクローニングと発現解析
ネコBrca2のcDNAの全長をクローニングして塩基配列を決定し、データベースに登録した。また、RT-PCR法により組織分布を調べ、乳腺等の広範な組織での発現を確認した。
3.Brca2とRad51との会合
イヌのBrca2とRad51について行った。イヌBrca2はそのC末端領域でRad51と会合することが判明したことに加え、エキソン11にコードされる中央部に転写活性化能をもつ領域が存在することが示唆された。
4.新規lkB分子MAILの機能解析
新規lkB分子MAILのゲノムをクローニングしてその構造を明らかにした。また、この分子の発現調節機構を解析した。
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