牛白血球粘着不全症(BLAD)の病態と生体防御修飾機構の解明

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11460146
• 研究機関: 酪農学園大学
• 研究代表者: 永幡 肇 酪農学園大学, 獣医学部, 教授 (10133571)
• 研究分担者: 林 正信 酪農学園大学, 獣医学部, 教授 (10130337) ; 稲波 修 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (10193559) ; 樋口 豪紀 酪農学園大学, 獣医学部, 講師 (00305905) ; 桑原 幹典 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (10002081)
• キーワード: BLAD / bovine neutrophils / β2-integrin / CD18-deficiency / L-selectin / signaling

研究概要

牛白血球粘着不全症(BLAD)の病態と生体防御機構について検討し以下の成績を得た。
(1)BLAD-好中球膜上の接着分子L-selectinは低発現であり,その情報伝達および関連した活性酸素の生成を確認した。
(2)BLAD-好中球の細胞傷害活性(NK)は,正常のそれに比較して有意に低値であったが,抗体依存性細胞傷害活性(ADCC)は,むしろ増加していることを示した。免疫グロブリンIgG-Fc受容体を介するADCCはBLAD好中球で代償的に増高する可能性を示した。
(3)ESRおよびスピントラップ法で好中球の活性酸素種を検索した。O_2^-は好中球のファゴソーム内において産生され,OHは細胞外で産生されることが示唆された。トラップ試薬DEPMPOについても検討した。
(4)好中球のF-アクチンとNADPH酵素活性化の細胞内情報伝達系を検索する目的で,種々の阻害剤の影響を検討した。F-アクチンの形成はPI-3キナーゼに依存し,PKC,ERK,p38MAPK,[Ca^<2+>]に非依存性である。NAPPH酵素はPKCと[Ca^<2+>]^iの増加に強く依存している。
CD11b/CD18欠損のBLAD好中球の活性酵素生成機構の特徴を提示した。

研究成果

• [文献書誌] Nagahata,H. et al.: "Analysis of the functional characteristics of L-selectin and its expression on…………."Immunology and Cell Biology. 78. 264-271 (2000)
• [文献書誌] Nagahata,H. et al.: "Analysis of cell-mediated cytotoxicity of CD18-deficient bovine neutrophils."Comparative Haematology International. 10. 102-104 (2000)
• [文献書誌] Kuwabara,M. et al.: "Spin-trapping detection of superoxides in polymorphonuclear leukocytes stimulated with opz."Japanese Journal of Veterinary Research. 48(1). 3-13 (2000)
• [文献書誌] Cui,Y.-D. et al.: "FMLP-induced formation of F-actin in HL60 cells in dependent on P113-K but not……."Inflammation Research. 49. 684-691 (2000)
• [文献書誌] Inanami,O. et al.: "ESR detection of intraphagosomal superoxide in PML using 5-D-5-M-1-P-N-oxide."Free Radical Research. 34. 81-92 (2001)
• [文献書誌] 永幡肇: "牛BLADの発見と撲滅の経過"日本産業動物獣医学会(学会シンポジウム). 172-175 (2001)