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ヒトリポ蛋白リパーゼを発現するトランスジェニック(Trg)ウサギ
1.Trgウサギの作製
我々は、ヒトリポ蛋白リパーゼを全身並びにマクロファージで発現するTrgウサギを作製することを目的として、ニワトリのβ-actinプロモータ、マクロファージスカベンジャーレセプタープロモータを用いてヒトのLPLcDNAと構築した。合計6800個の受精卵にマイクロインジェクションを行った結果、230羽の仔ウサギが産まれ、そのうち12羽のウサギゲノムDNAにヒトLPLが導入されているのを確認した。これらのfounderウサギを繁殖し、最終的に3系統のLPL Trgウサギを確立した。
2.Trgウサギの特徴
Trgウサギではヘパリンを静注した血清のLPLの活性が正常ウサギより約4倍高く、分子量60KDのヒトLPL蛋白がSDS-PAGEウエスタンプロットにより確認された。正常のウサギと比し、Trgウサギでは血漿の中性脂肪は約5倍、HDL-Cは約3倍の低下が認められた。血漿のリポ蛋白を解析したところ、TrgウサギのVLDLとIDLの量が著しく減少しており、LDLの量が正常ウサギより7倍増加している。
3.16週間の高コレステロール食負荷をしたTrgウサギの解析
高コレステロール食餌投与実験ではTrgウサギの場合は正常ウサギに比べて、高コレステロール血症が著明に抑制され、動脈硬化の発生が認められなかった。LPLの過剰発現によるレムナントリポ蛋白の分解除去は促進されることが示唆された。
4.WHHL LPL Trgウサギの作製
Trgウサギと高脂血症モデルであるWHHLウサギを交配させ、新規Trgウサギの作製に成功し、解析を行っている。
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