ヒト消化器癌細胞のアポトーシス制御因子とシグナル伝達に関する分子病理学的研究

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11470050
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 鳥取大学
• 研究代表者: 井藤 久雄 鳥取大学, 医学部, 教授 (60127610)
• キーワード: 胃癌 / 大腸癌 / アポトーシス / 温熱 / エタノール / Thymidine phosphorylase / 腫瘍内微小血管 / Caspase

研究概要

1.ヒト胃癌培養細胞6株にアデノウイルス・ベクターを用いて野生型p53遺伝子50MOIを導入した。何れにおいてもP53蛋白発現亢進に引き続き、P21およびBAX蛋白の発現が増加した。遺伝子導入によりMKN-1ではアポトーシスが誘発され、3株では増殖停止が生じたが、他の2株では明らかな変化がなかった。bcl-2やbcl-XIの発現に変化はなかった。p53強制発現による胃癌細胞の反応は多様であることが示された。
2.ヒト大腸癌64例の検討からThymidine Phosphorylase(TP)発現症例では、非発現症例に比較して、腫瘍の進行度に関係なく腫瘍内微小血管数が有意に増加し、腫瘍細胞のアポトーシスは減少した。腫瘍内微小血管数とアポトーシス細胞数は有意な逆相関を示した。TP発現はp53遺伝子変異や発現とは関係なく、また、大腸癌培養細胞株に野生型p53遺伝子を導入したが、TPの発現に変化はなかった。
3.ヒト胃癌培養細胞3株において、44℃30分間の加熱でアポトーシスを誘発した。2株では加熱によりTP酵素活性が上昇し、アポトーシス誘発に何らかの関与をしていることが示された。
4.ヒト胃癌培養細胞5株において3%ないし5%エタノールではアポトーシスが誘発され、10%ではネクローシスが誘発された。アポトーシス誘発過程において、caspase-3の活性化が生じた。Protein Kinase Cの関与について検討したが、細胞株によりアポトーシス誘発性および抑制性に作用することが示された。
5.ヒト胃癌培養細胞株においてcaspase-9の変異体を見いだし、その構造を決定した。変遺体の存在が各種のアポトーシス誘発刺激に対して、抵抗性に関与している可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Matsuura T,Ito H,et al: "Thymidine phosphorylase expression is associated with both increase ofintratumoral microvessels and decrease of apoptosis in human colorectal carcinomas"Cancer Res.. 59(19). 5037-5040 (1999)
• [文献書誌] Shomori K,Ito H,et al: "Thymidine phosphorylase expression in human colorectal mucosa,adenoma and carcinoma: role of p53 expression"Pathol Int.. 49(6). 491-499 (1999)
• [文献書誌] Doi R,Ito H,et al: "Expression of p53 oncoprotein increases intratumoral microvessel formation in human salivary gland carcinomas"J Oral Pathol Med.. 28(6). 259-263 (1999)
• [文献書誌] Tatebe S,Ito H,et al: "Adenovirus-mediated transfer of wild-type p53 gene results in apoptosis or growth srrest in human cultured gastric carcinoma cells"Int J Oncol.. 15(2). 229-235 (1999)
• [文献書誌] Matsura T,Ito H,et al: "Hydrogen peroxide-induced apoptosis in HL-60 cells requires caspase-3"Free Radic Res.. 30(1). 73-83 (1999)
• [文献書誌] Goto A,Ito H,et al: "Hyperthermia-induced apoptosis occurs both in a p53 gene-dependent and independent manner in three human gastric carcinoma cell lines"Oncol Rep.. 6(2). 335-339 (1999)