ヒト消化器癌細胞のアポトーシス制御因子とシグナル伝達に関する分子病理学的研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11470050
• 研究機関: 鳥取大学
• 研究代表者: 伊藤 久雄 鳥取大学, 医学部, 教授 (60127610)
• キーワード: 消化器癌 / アポトーシス / Thymidine phosphorylase / FAS遺伝子 / ARPP遺伝子 / MCM2 / 腫瘍内微小血管 / PKC

研究概要

1.複製ライセンス因子Minichromosome maintenance-2(MCM2)のモノクローナル抗体(MCM2-2H10)を作製した。ヒト胃癌培養細胞株から抽出した蛋白質を用いたウエスタン・ブロット法では120kDaのシングル・バンドを得た。胃癌培養細胞株の検討からMCM2はG1期初期からM期まで発現しているが、Ki-67はS期中期から発現していた。
2.ヒト胃癌培養細胞MKN-1、MKN-45およびMKN-74に対するエタノール誘発アポトーシスの検討から、protein kinase C(PKC)はアポトーシス促進性に、PKA、PKGは抑制性に作用することが示唆された。
3.食道癌培養細胞株TE-1からアポトーシス誘発時に発現する新規遺伝子ARPP(a protein that has Ankirin Repeat motif,and Proline-rich region)をクローニングした。ARPPは329アミノ酸をコードしており、構造からはIκB familyに属し、NF-κBのシグナル伝達に関与するもの考えられた。
4.ヒト胃癌70例の検討からThymidine phosphorylase(TP)発現症例では、非発現症例に比較して、腫瘍の進行度に関係なく腫瘍内微小血管数が有意に増加し、腫瘍細胞のアポトーシスは減少した。腫瘍内微小血管数とアポトーシス細胞数は有意な逆相関を示した。TP発現はp53遺伝子変異や発現とは関連がなかった。
5.胃高分化腺癌75病変の検討からFas、Fas-Lが種々の程度に発現しており、後者は胃癌の進展とともに発現が上昇し、それはアポトーシス細胞の減少と関連していた。培養細胞8株中MKN-45でFASが高発現、MKN-28では発現が著しく低かった。Fas遺伝子変異は見いだされず、Fas発現との関連はなかった。

研究成果

• [文献書誌] Osaki M,Ito H, et al: "Thymidine phosphorylase expression results in a decrease in apoptosis and increase in intratumoral microvessel density in human gastric carcinomas."Virchows Arch. 437(1). 31-36 (2000)
• [文献書誌] Sakatani T,Ito H, et al: "Expressions of thymidine phosphorylase (dThdPase) and vascular endothelial growth factor on angiogenesis in intestinal-type gastric carcinoma."Oncology Reports. 7(4). 831-836 (2000)
• [文献書誌] MatsuuraT,Ito H, et al: "Preoperative treatment with tegafur suppositories enhances apoptosis and reduces the intratumoral microvessel density of human colorectal carcinoma."Cancer. 88(5). 1007-1015 (2000)
• [文献書誌] Kasagi N,Ito H, et al: "Role of Protein Kinases in the Ethanol-induced Apoptosis of Cultured Human Gastric Carcinoma Cells"Biomedical Research. 21(1). 1-7 (2000)