2000 年度実績報告書

自己寛容破綻による自己抗体の生産誘導機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号	11470089
研究機関	慶應義塾大学
研究代表者	小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)
研究分担者	天谷雅行慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563) 西川武二慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579) 樗木俊聡慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50233200)
キーワード	自己寛容 / T細胞 / B細胞 / 自己免疫疾患 / 天疱瘡 / ノックアウトマウス / Rag-2
研究概要	あるタンパク質のノックアウトマウス(KOマウス)においてはそのタンパク質に対する自己寛容は成立していない。この事実を利用し、皮膚科領域の自己免疫疾患の一つ、尋常性天疱瘡のモデルマウスを作製した。尋常性天疱瘡の抗原であるデスモグレイン3(DSG3)のKOマウスにリコンビナントDSG3を免疫し、抗DSG3抗体が生産されることを確認した後、そのマウスの脾臓細胞をrag-2KOマウス(T細胞やB細胞を持たない免疫不全マウスであるがDSG3は発現する)に移植した。その結果、自己抗体(抗DSG3抗体)の生産が持続し、生産された抗体が扁平重層上皮に沈着し、尋常性天疱瘡と同様の症状を示すマウスを作製することに成功した。さらに、T細胞とB細胞のいずれの自己寛容の破綻が重要な位置を占めるのかを明らかにするために、あるいは、野生型のマウスにおいてDSG3に対する自己寛容を担う細胞がT細胞であるかB細胞であるかあるいはその両方であるかを以下の方法で検討した。野生型マウスやDSG3KOマウスの脾臓細胞を抗CD4抗体と抗CD8抗体によって染色した後に、磁気ビーズ法とセルソーターを用いてT細胞のみを分離した。同様に、野生型マウスやDSG3KOマウスの脾臓細胞をB細胞に対する種々の交代によって染色した後に、磁気ビーズ法とセルソーターを用いてB細胞のみを分離した。両者を様々な組み合わせで混合した後にrag-2KOマウスに移植し、抗DSG3抗体の生産の有無をリコンビナントDSG3とそれに対して作製した単クローン抗体を用いたサンドイッチELISAによって経時的に検討した。その結果、T細胞とB細胞の両方がDSG3KOマウス由来の場合にのみ自己抗体の生産が見られ尋常性天疱瘡の症状が出現した。したがって、通常はT細胞、B細胞の両方においてDSG3に対する自己寛容が成立していると考えられる。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Toyama-Sorimachi,N., et al.: "Mouse CD94 participates in Qa-1-mediated self recognition by NK cells and delivers inhibitory signals independent of Ly-49."J.Immunol.. (in press). (2001)
[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Inducible expression of Stat4 in dendritic cells and macrophages and its critical role in innate and adaptive immune responses."J.Immunol.. (in press). (2001)
[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Expression of functional IL-2 receptors on mature splenic dendritic cells."Eur.J.Immunol.. 30. 1453-1457 (2000)
[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Synergistic effects of IL-4 and IL-18 on IL-12 dependent interferon-γ production by dendritic cells."J.Immunol.. 164. 64-71 (2000)
[文献書誌] Amagai,M., et al.: "Use of autoantigen knockout mice to develop an active autoimmune disease model."J.Clin.Invest.. 105. 625-631 (2000)
[文献書誌] Andjelic,S., et al.: "Phosphatidylinositol 3-kinase and NF-κB/Rel are at the divergence of CD40-mediated proliferation and survival pathways."J.Immunol.. 165. 3860-3867 (2000)
[文献書誌] Proby,C.M., et al.: "Development of chimeric molecules for recognition and targeting of antigen-specific B cells in pemphigus vulgaris."Br.J.Dermatol.. 142. 321-330 (2000)
[文献書誌] Ohteki,T., et al.: "Interleukin-12 dependent interferon-γ production by CD8α^+ lymphoid dendritic cells."J.Exp.Med.. 189. 1981-1986 (1999)

2000 年度 実績報告書

自己寛容破綻による自己抗体の生産誘導機構の解明

研究代表者

小安 重夫 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)

研究成果

[文献書誌] Toyama-Sorimachi,N., et al.: "Mouse CD94 participates in Qa-1-mediated self recognition by NK cells and delivers inhibitory signals independent of Ly-49."J.Immunol.. (in press). (2001)

[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Inducible expression of Stat4 in dendritic cells and macrophages and its critical role in innate and adaptive immune responses."J.Immunol.. (in press). (2001)

[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Expression of functional IL-2 receptors on mature splenic dendritic cells."Eur.J.Immunol.. 30. 1453-1457 (2000)

[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Synergistic effects of IL-4 and IL-18 on IL-12 dependent interferon-γ production by dendritic cells."J.Immunol.. 164. 64-71 (2000)

[文献書誌] Amagai,M., et al.: "Use of autoantigen knockout mice to develop an active autoimmune disease model."J.Clin.Invest.. 105. 625-631 (2000)

[文献書誌] Andjelic,S., et al.: "Phosphatidylinositol 3-kinase and NF-κB/Rel are at the divergence of CD40-mediated proliferation and survival pathways."J.Immunol.. 165. 3860-3867 (2000)

[文献書誌] Proby,C.M., et al.: "Development of chimeric molecules for recognition and targeting of antigen-specific B cells in pemphigus vulgaris."Br.J.Dermatol.. 142. 321-330 (2000)

[文献書誌] Ohteki,T., et al.: "Interleukin-12 dependent interferon-γ production by CD8α^+ lymphoid dendritic cells."J.Exp.Med.. 189. 1981-1986 (1999)

2000 年度実績報告書

小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)