T細胞の表皮親和性発現に関する糖転移酵素の制御機構

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11470184
• 研究機関: 杏林大学
• 研究代表者: 塩原 哲夫 杏林大学, 医学部, 教授 (10118953)
• 研究分担者: 早川 順 杏林大学, 医学部, 助手 (30255393) ; 水川 良子 杏林大学, 医学部, 助手 (50301479) ; 寺木 祐一 杏林大学, 医学部, 講師 (10188667) ; 成松 久 創価大学, 生命研, 教授 (40129581)
• キーワード: Fucosyltransferase VII / CLA / Th1細胞 / 免疫組織化学 / CD4^+T細胞 / CD8^+T細胞

研究概要

T細胞の皮膚へのホーミングに関し重要な役割をしている糖転移酵素fucosyltransferase VII(Fuc-TVII)の蛋白レベルの発現につき、monoclonal Abを用いて以下の解析を行った。
1.抗原刺激後のどの時期の細胞が最もE-selectinと良く結合し、それはFuc-VII,CLA発現とどのように関係しているかの検討を行った。末梢血リンパ球(PBMC)よりCD4^+CLA^-細胞を分離し、それを抗CD3抗体で刺激し経時的に細胞を回収し、Fuc-TVII,CLA発現に加え、(E-selectin Ig Fcキメラを用いた)E-selectinとの結合能をフローサイトメトリー及び酵素組織化学を用いて検討した。刺激後速やかに細胞質にFuc-TVIIの発現がup regulationし、それと平行して細胞表面にE-selectin ligandの発現を確認した。つまりこの時期のCD4^+T細胞はCLAの発現を認めていないにもかかわらず、E-selectinと結合しうることが明らかになった。その後CLAの発現が高まる(Fuc-TVII^+CLA^+)とともに、E-selectinとの結合する細胞数はさらに増加した。時間の経過とともに、Fuc-TVII発現は低下し、CLAのみ発現する細胞が増加じたが、これらの細胞はE-selectinとの結合を殆ど認めなかった。このようにE-selectinへの結合能は、CLAではなくFuc-TVIIの発現に依存性であることが明らかになった。
2.PBMC中のFuc-TVII^+CLA^-,Fuc-TVII^+CLA^+,Fuc-TVII^-CLA^+T細胞の割合を、健常人とアトピー性皮膚炎(AD)から分離したCD4^+T細胞を用いて比較検討した。健常人では、CLA^+Fuc-TVII^-T細胞の割合が最も高かったが、Fuc一TVII^+CLA^-T細胞は殆ど認めなかった。一方、ADではFuc-TVII^+CLA^+T細胞が明らかに増加しており、他2者は殆ど健常人と変わりなかった。また治療前後の類天疱瘡患者CD4^+T細胞についても同様の検討を行ったところ、治療後にFuc-TVII^-CLA^+T細胞の著明な増加を認めた。以上の結果より、Fuc-TVII-CLA^+T細胞はこれから皮膚に遊走する細胞ではなく、皮膚から末梢循環に戻ってきた細胞である可能性が考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Shiohara T, et al.: "Gamma-delta T cells with emphasis on their functional role in the epidermis."Chem Immunol. (In press). (2001)
• [文献書誌] Mizukawa Y, et al.: "Immunohistochemical detection of skin-homing T cells expressing fucosyltransferase VII (Fuc-TVII) in vitro and in situ."Lab Invest. (In press). (2001)
• [文献書誌] Mizukawa Y, et al.: "Virus-induced immune dysregulation as a triggering factor for the development of drug rashes and autoimmune diseases : with emphasis on EB virus, human herpesvirus 6 and hepatitis C virus."J Dermatol Sci. 22. 169-180 (2000)
• [文献書誌] Teraki Y, et al.: "Increased circulating skin-homing lymphocyte-associated antigen (CLA)+type 2 cytokin-producing cells, and decreased CLA+type 1 cytokine-producing cells in atopic dermatitis."Br J Dermatol. 143. 373-378 (2000)
• [文献書誌] Kano Y, et al.: "Current understanding of cytomegalovirus infection in immunocompetent individuals."J Dermatol Sci. 22. 196-204 (2000)
• [文献書誌] Shiohara T.: "Viral infections, allergy and autoimmunity : a complex, but fascinating link."J Dermatol Sci. 22. 149-151 (2000)
• [文献書誌] Nakayama F, et al.: "Expression of cutaneous lymphocyte-associated antigen regulated by a set of glycosyltranferases in human T cells : involvement of α1,3-fucosyltransferase VII and β1,4-galactosy ; Iramsferase I."J Invest Dermatol. 115. 299-306 (2000)