| 研究課題/領域番号 |
11470185
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
皮膚科学
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| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
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研究代表者 |
天谷 雅行 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)
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| 研究分担者 |
鈴木 春巳 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (70235985)
小安 重夫 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)
西川 武二 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| キーワード | 自己免疫 / 天疱瘡 / 自己抗体 / モデルマウス / ELISPOT法 / ノックアウトマウス / 免疫寛容 / 水疱症 |
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| 研究概要 |
自己免疫性疾患は自己抗原に対する免疫寛容が破綻することにより発症すると考えられているが、その詳細なメカニズムは不明である。天疱瘡は、細胞間接着分子であるデスモグレインに対する自己抗体により誘導される自己免疫性水疱性疾患である。本研究は、天疱瘡患者検体および天疱瘡モデルマウスの双方を材料とし、ヒトおよびマウスの両側面から天疱瘡における病的自己抗体産生機構を解明することを目指した。患者検体を用いたアプローチとして、患者末梢血中に存在する自己抗体産生B細胞の検出系としてELISPOT法を確立した。さらに、天疱瘡末梢血より分離されたDsg3特異的B細胞によるin vitro抗体産生系を開発し、in vitro抗体産生系におけるT細胞の存在が必須であることを明らかにした。モデルマウスを用いたアプローチとして、ノックアウトマウスにおいて欠失している蛋白に対して免疫寛容が成立していない事実を利用して、天疱瘡モデルマウスの作成に成功した。尋常性天疱瘡の自己抗原であるデスモグレイン3(Dsg3)のノックアウトマウスに、組換えDsg3蛋白(rDsg3)を免疫すると野生型では認められないDsg3に対する自己抗体の産生が認められ、さらに、Dsg3を発現している野生型マウスに免疫したDsg3ノックアウトマウスのT細胞、B細胞を移植することにより、持続的な自己抗体の産生による水疱形成が誘導された。さらに、ノックアウトマウスにおけるDsg3に対する自己抗体産生に関するB細胞、T細胞の役割、ならびに相互関係を検討した結果、T細胞及びB細胞の両細胞レベルで免疫寛容が成立していないことが重要であることを示した。また、天疱瘡モデルマウスより、水疱形成を誘導できるモノクローナル抗体の単離を試み、複数の抗体を単離した。今後はさらに、抗体産生に関与するT細胞クローンの単離、同定、さらに、病的抗体抗体のエピトープの解析、T細胞エピトープの同定と、抗体産生機序を分子レベルで解析することを目指す。
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