| 研究概要 |
lipofectin法を用いたMARCO : mitochondrial antisense RNA for cytochrome c oxidaseのin vivo効果の検討。MARCO発現プラスミドをlipofectin法を用いてマウスB細胞白血病株MOPC、T細胞白血病株EL-4、及び骨髄単球性白血病細胞株WEHI-3Bに遺伝子導入を行なった。導入効率は10%程度であったが、in vitroでの細胞死誘導能を細胞数で経時的に観察したところコントロールと比較して有為に減少が確認された。次にin vivoでの後抗腫瘍効果を担癌マウスに腹腔内、及び経静脈投与して観察すると、MARCOをlipofectin法で3日間投与した群では、いずれの細胞の担癌マウスにおいても4週程度の生存率の延長が認められた。2週間投与では、3カ月以上の生存延長が観察された。投与量依存性も確認された。生存率の上昇は、経静脈投与、及び白血病芽球腫への直接投与においても同様に観察された。副作用は、lipofectin投与12時間から24時間後の白球数の低下のみで、主要臓器への影響は病理組織像でも認められなかった。Adex法を用いたMARCOのin vivo効果。Adenovirus由来cosmid shattle vectorを用いてrecombinant Adex-MARCO virusを作成し、上述のマウス白血病細胞株に対するin vitro遺伝子導入効率は観察したところ約50%程度であった。in vitro,in vivo抗腫瘍効果をAdex法とlipofectin法とで比較したところ、ともにliposome法がAdex法に勝っていた(白藤、他。投稿中)。Promoter置換による腫瘍細胞特異的なMARCOの発現。Lck promoterでMARCOが発現するプラスミド、ImmunoglobulinのpromoterでMARCOが発現するプラスミドを作成、その発現効率、抗腫瘍効果、選択特異性を現在解析中である。
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