1999 年度実績報告書

血栓症の発症分子機構の解明:血液凝固・線溶因子の組織内発現異常解析

研究課題

研究課題/領域番号	11470209
研究種目	基盤研究(B)
研究機関	名古屋大学
研究代表者	齋藤英彦名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)
研究分担者	山本晃士名古屋大学, 医学部, 医員小嶋哲人名古屋大学, 医学部, 助教授 (40161913)
キーワード	老化 / 血栓症 / 敗血症 / 遺伝子発現 / 血液凝固 / 線溶能
研究概要	C57BL6/J系統のオスの若年マウス(8週齢)と、自然経過で加齢させた老齢マウス(12ヵ月齢および24ヵ月齢)をおのおの十数匹ずつ用意した。エンドトキシン(Lipopolysaccharide:LPS)5μgをそれぞれのマウスに腹腔内投与し、2,4,8,16,24時間後に肝、腎、副腎、肺、心臓、脂肪組織を摘出した。対照マウスには生理食塩水0.2mlを腹腔内投与し、同様に各組織を摘出した。採取した組織からRNAを抽出した後、競合的RT-PCR法を用いて、主要な血液凝固因子のひとつである組織因子(Tissue factor:TF)と、線溶制御因子であるPAI-1(Plasminogen activator inhibitor-1)のmRNA発現量を定量した。その結果、若年マウスと比較して老齢マウス、特に24ヵ月齢のマウスにおいては、LPS投与2,4時間後における肝、腎でのPAI-1 mRNA発現量の増加が著明であった。またTF mRNAについても、老齢マウスの腎において、やはりLPS投与4,8時間後に若年マウスより顕著な発現上昇を認めた。次に、これら血液凝固線溶因子のmRNA発現変化を、各組織のホルマリン固定後に作製したパラフィン切片を用い、in situ hybridization法によっても検索した。若年マウスに比較して老齢マウスでは、肝臓における類洞血管内皮細胞および肝細胞において、また腎糸球体内の血管内皮細胞においてPAI-1 mRNAのシグナルが著明に増強していた。以上より、エンドトキシン投与による敗血症という病態では、老齢マウス組織において局所における血液凝固能が著しく増加し、血栓傾向の著明な増大をきたしていると考えられた。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Izumi,T., Nagaoka,U., Saito,H., et al.: "Novel deletion and insertion mutations cause splicing defects, leading to severe reduction in mRNA levels of the A subunit in severe factor XIII deficiency."Thromb Haemost. 79. 479-485 (1998)
[文献書誌] Katsumi,A., Kojima,T., Saito,H., et al.: "The Carboxyl-Terminal Region of Protein C is Essential for Its Secretion."Blood. 91. 3784-3791 (1998)
[文献書誌] Honda,S., Tomiyama,Y., Saito,H., et al.: "A Two-Amino Acid Insertion in the Cys146-Cys167 Loop of the αIIb Subunit Is Associated with a Variant of Glanzmann Thrombasthenia. Critical Role of Asp 163 in Ligand Binding."J Cin Invest. 102. 1183-1192 (1998)
[文献書誌] Kida M., Souri M., Saito,H., et al.: "Transcriptional Regulation of Cell Type-specific Expression of the TATA-less A Subunit Gene for Human Coagulation Factor XIII."J.Biol Chem. 274. 6138-6147 (1999)
[文献書誌] William C. Nichols, Saito,H., et al.: "ERGIC-53 Gene Structure and Mutation Analysis in 19 Combined Factors V and VIII Deficiency Families."Blood. 93. 2261-2266 (1999)
[文献書誌] Yamamoto,K., Shimokawa,T., Saito,H., et al.: "Regulation of murine protein C gene expression in vivo: effect of tumor necrosis factor-α, inteleukin-1, and transforming growth factor-β."Thromb Haemost. 82. 1297-1301, (1999)

1999 年度 実績報告書

血栓症の発症分子機構の解明:血液凝固・線溶因子の組織内発現異常解析

研究代表者

齋藤 英彦 名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)

研究成果

[文献書誌] Izumi,T., Nagaoka,U., Saito,H., et al.: "Novel deletion and insertion mutations cause splicing defects, leading to severe reduction in mRNA levels of the A subunit in severe factor XIII deficiency."Thromb Haemost. 79. 479-485 (1998)

[文献書誌] Katsumi,A., Kojima,T., Saito,H., et al.: "The Carboxyl-Terminal Region of Protein C is Essential for Its Secretion."Blood. 91. 3784-3791 (1998)

[文献書誌] Honda,S., Tomiyama,Y., Saito,H., et al.: "A Two-Amino Acid Insertion in the Cys146-Cys167 Loop of the αIIb Subunit Is Associated with a Variant of Glanzmann Thrombasthenia. Critical Role of Asp 163 in Ligand Binding."J Cin Invest. 102. 1183-1192 (1998)

[文献書誌] Kida M., Souri M., Saito,H., et al.: "Transcriptional Regulation of Cell Type-specific Expression of the TATA-less A Subunit Gene for Human Coagulation Factor XIII."J.Biol Chem. 274. 6138-6147 (1999)

[文献書誌] William C. Nichols, Saito,H., et al.: "ERGIC-53 Gene Structure and Mutation Analysis in 19 Combined Factors V and VIII Deficiency Families."Blood. 93. 2261-2266 (1999)

[文献書誌] Yamamoto,K., Shimokawa,T., Saito,H., et al.: "Regulation of murine protein C gene expression in vivo: effect of tumor necrosis factor-α, inteleukin-1, and transforming growth factor-β."Thromb Haemost. 82. 1297-1301, (1999)

1999 年度実績報告書

齋藤英彦名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)