ヒト白血病発症における、癌抑制遺伝子WT1の役割の解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11470210
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 杉山 治夫 大阪大学, 医学部, 教授 (70162906)
• 研究分担者: 相馬 俊裕 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (40273619) ; 岡 芳弘 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (20273691) ; 小川 啓恭 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (80194447) ; 尾路 祐介 大阪大学, 医学部, 助手 (20294100)
• キーワード: WT1 / tumor suppressor gene / oncogene / WWドメイン

研究概要

WT1遺伝子は、Wilms'tumorではtumor suppressor geneとして機能しているが、白血病や固形がんの一部(〜大部分)では、oncogenicな機能を果たしている。この機能の2面性は、WT1タンパクと、WT1タンパクに結合し、WT1タンパク機能をmodifyするWT1結合タンパクによって生じると考えられる。そこで、WT1結合タンパクの単離を試みた。WT1を高発現している白血病細胞株K562から、WT1タンパクを結合させたカラムを用いて、WT1結合タンパクを単離し、クローニングし、WTIPと命名した。このタンパクは分子量120KDaで、957コのアミノ酸からなり、アミノ酸配列を141〜217番目に、WWドメイン(Pro-richなりガンドとのタンパク-タンパク相互作用を担うドメインであり、Trp(w)-21a.a.-Trp(w)-21a.a.-Proという共通なモチーフをもち,Trp(w)が2コあるため、WWドメインとよばれる)をもち、このWWドメインが15コのアミノ酸配列をはさんでタンデムに2つ存在した。このような構造は、pre-Mrna splicing factorであるyeast PRP40やFBP21に共通した構造であるので、WTIPもpre-Mrnaのsplicingに関与している可能性が高い。またWTIPアンチセンスオリゴマーで白血病細胞を処理すると、その増殖が著名に抑制され、細胞増殖に重要な役割を果たしていることが明らかになった。WTIPノックアウトマウスを作製し、WTIPの機能を明確にしたい。

研究成果

• [文献書誌] Tsuboi A.et al.: "Constitutive expression of the Wilms' tumor gene WT1 inhibits the differentiation of myeloid progenitor cells but promotes then proliferation in response to granulocyte-colony stimulating factor(G-CSF)"Leukemia Research. 23. 499-505 (1999)
• [文献書誌] Oji Y.et al.: "Expression of the Wilms' tumor gene WT1 in solid tumors and its involvement in tumor cell growth"Japanese Journal of Cancer Research. 90. 194-204 (1999)
• [文献書誌] Yamagami T.et al.: "Suppression of Wilms' tumor gone (WT1) expression induces G_2/M arrest in leukemic cells"Leukemia Research. 30. 55-61 (1998)
• [文献書誌] Inoue K.et al.: "Wilms' tumor gone (WT1)competes with differentiation-inducing signal in hematopoietic progenitor cells"Blood. 91. 2969-2976 (1998)