1999 年度実績報告書

放射線照射による大脳皮質形成障害マウスを用いた神経細胞移動関連遺伝子の検索

研究課題

研究課題/領域番号	11470222
研究種目	基盤研究(B)
研究機関	京都府立医科大学
研究代表者	伏木信次京都府立医科大学, 医学部, 教授 (80150572)
研究分担者	矢追毅京都府立医科大学, 医学部, 助手 (40311914)
キーワード	放射線 / 大脳皮質 / 神経細胞 / 細胞移動 / 遺伝子
研究概要	本研究では、これまでに私たちが明らかにしてきた、胎生期の低線量電離放射線照射が引き起こす大脳皮質神経細胞移動への抑制的影響について、そのメカニズムに関与する遺伝子を分子生物学的手法により探索し、大脳皮質層構造形成並びに神経回路網の発達に関わる重要な新規遺伝子の同定を目指している。平成11年度はまず、胎齢14.5日目マウス胎仔全脳に対する低線量(0.5Gy)X線照射が及ぼす遺伝子発現状態への影響をRLCS法により評価することに着手した。これにより見出された、発現変動を示すいくつかの遺伝子の同定を、申請備品として購入した自動DNAシークエンサーを用いて開始した。更に、単一細胞由来全cDNAを一方向生に効率良く増幅する方法などの、単一神経細胞由来cDNAライブラリーの作製や単一細胞RLCS法のための基盤技術を検討した。逆転写酵素の持つターミナルヌクレオチジルトランスフェラーゼ活性を利用して、cDNAの両端に異なる配列を導入した、単一細胞由来全cDNAを合成したのち、PCRにより増幅し、cDNAライブラリーを作製する系やRLCS法の実施に十分な量の単一細胞由来全cDNAを得る系を組み立てた。また、単一細胞を効率よく単離する方法についても検討を進めた。マイクロキャピラリーを用いて単一細胞を単離・回収し、その全cDNAを増幅する系を確立することができた。低線量X線照射による遺伝子発現変化を組織レベルでRLCS法により解析することによって、移動層の神経細胞における、発現量の多い遺伝子の変化を検出できるものと期待される。しかし、移動中の神経細胞は必ずしも一様な細胞集団ではないことから、移動に関わる遺伝子を単離するためには、最終的には単一神経細胞間で遺伝子発現状態を比較する必要がある。今年度の研究を通じてその技術的基盤を得たと考えている。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Shiga K,Fukuyama R,Kimura S,Nakajima K,Fushiki S.: "Mutation of the sterol 27-hydroxylase gene(CYP27)results in truncation of mRNA expressed in leucocytes in a Japanese family with cerebrotendinous xanthomatosis"J.Neurol.Neurosurg.Psychiatry. 67. 675-677 (1999)
[文献書誌] Yuh I,Yaoi T,Watanabe S,Okajima S, Hirasawa Y,Fushiki S.: "Up-regulated uridine kinase gene identified by RLCS in the ventral horn after crush injury to rat sciatic nerves"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 266. 104-109 (1999)
[文献書誌] Morimoto S,Sasaki S,Itoh H,Nakata T,Takeda K,Nakagawa M,……Fushiki S.: "Sympathetic activation and contribution of genetic factors in hypertension with neurovascular compression of the rostral ventrolateral medulla"J.Hypertens.. 17. 1577-1582 (1999)
[文献書誌] Hirai K,Yoshioka H,Kihara M,.,Sakamoto T,Sawada T,Fushiki S.: "Inhibiting neuronal migration by blocking NMDA receptors in the embryonic rat cerebral cortex : a tissue culture study"Dev.Brain Res.. 114. 63-67 (1999)
[文献書誌] Hirai K,Yoshioka H,Kihara M,.,Sakamoto T,Sawada T,Fushiki S.: "Effects of ethanol on neuronal migration and neural cell adhesion molecules in the embryonic rat cerebral cortex : a tissue culture study"Dev.Brain Res.. 118. 205-210 (1999)
[文献書誌] Kanemura Y,Hiraga S,Arita N,……,Fushiki S,Yoshimine T.: "Isolation and expression analysis of a novel human homologue of the Drosophila glial cells missing(gcm)gene"FEBS Letters. 442. 151-156 (1999)

1999 年度 実績報告書

放射線照射による大脳皮質形成障害マウスを用いた神経細胞移動関連遺伝子の検索

研究代表者

伏木 信次 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (80150572)

研究成果

[文献書誌] Shiga K,Fukuyama R,Kimura S,Nakajima K,Fushiki S.: "Mutation of the sterol 27-hydroxylase gene(CYP27)results in truncation of mRNA expressed in leucocytes in a Japanese family with cerebrotendinous xanthomatosis"J.Neurol.Neurosurg.Psychiatry. 67. 675-677 (1999)

[文献書誌] Yuh I,Yaoi T,Watanabe S,Okajima S, Hirasawa Y,Fushiki S.: "Up-regulated uridine kinase gene identified by RLCS in the ventral horn after crush injury to rat sciatic nerves"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 266. 104-109 (1999)

[文献書誌] Morimoto S,Sasaki S,Itoh H,Nakata T,Takeda K,Nakagawa M,……Fushiki S.: "Sympathetic activation and contribution of genetic factors in hypertension with neurovascular compression of the rostral ventrolateral medulla"J.Hypertens.. 17. 1577-1582 (1999)

[文献書誌] Hirai K,Yoshioka H,Kihara M,.,Sakamoto T,Sawada T,Fushiki S.: "Inhibiting neuronal migration by blocking NMDA receptors in the embryonic rat cerebral cortex : a tissue culture study"Dev.Brain Res.. 114. 63-67 (1999)

[文献書誌] Hirai K,Yoshioka H,Kihara M,.,Sakamoto T,Sawada T,Fushiki S.: "Effects of ethanol on neuronal migration and neural cell adhesion molecules in the embryonic rat cerebral cortex : a tissue culture study"Dev.Brain Res.. 118. 205-210 (1999)

[文献書誌] Kanemura Y,Hiraga S,Arita N,……,Fushiki S,Yoshimine T.: "Isolation and expression analysis of a novel human homologue of the Drosophila glial cells missing(gcm)gene"FEBS Letters. 442. 151-156 (1999)

1999 年度実績報告書

伏木信次京都府立医科大学, 医学部, 教授 (80150572)